人OGPelisa試劑盒間接法操作方法:
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃*夜。
2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW(超純水)洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
3、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
4、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
5、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O?D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
人OGPelisa試劑盒待檢樣本有體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。供貨期是3-5天,以及是盒裝液體產品性狀和低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸的運輸條件。
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