產品名稱：人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA 試劑盒
：135 64515386
產品規格：48T/96T
ELISA試劑盒說明書
Elisa試驗在實驗室中比較常見，那么elisa實驗具體步驟怎么做，有沒有比較詳細的elisa試劑盒說明書
Elisa試劑盒說明書如下：
ELISA試劑盒說明書1:用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10靏／ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。
2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3.加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4.加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。 5.終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。 ELISA試劑盒說明書二：用于檢測未知抗體的間接法：
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10靏／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。 2.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。（同時做空白、陰性及陽性孔對照）
3.于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4.于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘 5.于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6.可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
ELISA 是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩定、易保存、操作簡便、結果判斷較客觀等因素，以及既適宜于大規模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測，既可以做定性試驗也可以做定量分析等優點，已廣泛應用于微生物學、寄生蟲學、腫瘤學和細胞因子等領域
人凋亡相關因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒間接法簡單操作步驟：
（1）、將特異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原；
（2）、加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗-體復合物；
（3）、加酶標抗抗體；
（4）、加入酶促反應底物，發生顯色反應，顯色的深淺與待測抗體的量成正比。
ELISA試劑盒操作技術相關的注意事項：
- (FAS/CD95)ELISA試劑盒說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。
(3)封板溫育時，各孔一定要封嚴，防止陽性標本的液體蒸發，產生周邊現象從而導致“花板”的出現。
(4)用洗板機洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。
(5)合理安排檢測量，以免反應板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。
(9)應保證C清潔，整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結果。
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人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA 試劑盒所生產銷售的各種ELISA試劑盒均采用的是定量夾心酶聯免疫技術。抗體具體為FGF6已經被預先涂到微孔板。標準和樣品吸入井和任何FGF6目前被綁定的固定化抗體。*共軛的抗體特異性FGF6除去任何未結合的物質后，加入到孔中。抗*蛋白共軛的辣根過氧化物酶（HRP）的洗滌后，加入到孔中。經過洗滌，以除去任何未結合的抗*蛋白的酶試劑，底物溶液加入到孔中，顯色成比例的量的初始步驟中的約束的FGF6。彩色顯影被停止并測量的顏色的強度。
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人GTP酶活化蛋白(GAP)ELISA 試劑盒如何鑒別不正規偽劣ELISA試劑盒
隨著生命科學技術的高速發展，生物公司如雨后春筍一般紛紛涌現，各類生物試劑產品大大方便了科研工作者的工作。無疑，健康有序的生物試劑產業環境和秩序對于整個行業的健康發展有著舉足輕重的作用。然而，近來許多客戶向我們反映一些唯利是圖的公司和小作坊，用不正規偽劣的ELISA試劑盒坑害廣大的科研工作者，他們往往唯利是圖，無視科學研究的嚴謹性和嚴肅性，讓廣大的科研工作者被動造假，嚴重擾亂了科研工作，嚴重擾亂了市場秩序，所以我們有義務，有責任揭露這些作偽造假者制作不正規偽劣ELISA試劑盒的手法，同時提供如何鑒別這些不正規偽劣ELISA試劑盒的方法，供廣大的科研工作者和用戶參考，讓那些掛羊頭賣狗肉，冒牌進口試劑，以及全無誠信，作假造偽者，如過街之鼠，人人喊打。
造假一：在國外注冊公司，國內生產，隱瞞生產產地，明明是國產試劑卻宣稱國外進口虛報高價，欺騙廣大用戶。
鑒別方法：將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”關鍵詞在google上搜索，各類論壇的用戶會將該ELISA試劑盒的質量和效果，是否偽劣一一有所討論。 造假二：仿冒進口ELISA試劑盒，使得進口分裝ELISA質量參差不齊，魚龍混雜，很多都是經小作坊粗劣加工而成，這樣的試劑盒偶爾可以僥幸做出結果，如果做不出來，所購買的公司又沒有完善的售后服務，往往對客戶的問題推三阻四，推脫責任，zui后還是消費者吃虧。
鑒別方法：直接打給生產廠商，詢問他們試劑盒抗原和抗體的來源，索要試劑盒說明書，然后利用網絡確認這些信息，正規的ELISA生產商，這些信息都是非常齊全，如果信息不全，則該ELISA的制造水平和質量都會很差。 造假三：某些不正規廠家為了夸大其生產ELISA涵蓋的指標的范圍，用一種指標來冒充其它指標，造成各種種屬、各種指標都可以做的假象。比如用TGFβ這樣的指標代替大多數試劑盒的其他指標作為檢測抗體，同樣可以獲得良好的標準曲線。因為TGFβ在大多數哺乳類動物中（人、大鼠、小鼠、豬、牛„„）都有廣泛表達，種屬間抗原的氨基酸序列同源性達*，TGFβ隨著其他因子的影響，其表達水平也會發生相應的變化，一般客戶很難察覺，因此這樣的惡性造假行為使得消費者被動造假，后果極其嚴重，因此善意提醒客戶警惕此類作假試劑
