標本的采集與保存：

1、血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可，或將上清置于-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30 分鐘內于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測，或將上清置于-20oC 或-80oC 保存，但應避免反復凍融。

3、組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨，該過程需在冰上進行（有條件實驗室可選用機器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復凍融進一步處理（超聲破碎過

我司提供免費代測服務，凡購買我司試劑盒的用戶，只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據實驗工作量和難易程度，雙方協定實驗周期，保質保量完成委托實驗，并將實驗結果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。

從標本收集、保存、預試驗、實驗、數據分析等全實驗過程提供完整的技術指導。

公司采用的全是進口原材料研，發靈敏性高，高效性，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強，無效包退包換，公司提供免費代測服務，各種種屬ELISA試劑盒產品齊全，質量可靠。

實驗室注意事項：

1、所有試劑不能與皮膚直接接觸。

2、務必使用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準用同一種工具同時連續取用多種試劑。

3、取完一種試劑后，應將工具洗凈、擦干后，方可取用另一種試劑。

4、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處。

5、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內。

實驗標準品圖：

40 ng/L，5號標準品，150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

20 ng/L，4號標準品，150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

10 ng/L，3號標準品，150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

5 ng/L，2號標準品，150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.5 ng/L，1號標準品，150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行，已獲得國家承認的“三證”，每一個產品都有對應的批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標本用聯有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用加入到標本稀釋液中使RF降解；

補體的控制方法：

①用EDTA稀釋標本；

②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活；

2.外源性干擾因素：包括標本溶血、細菌污染、保存時間過長或凝固不全等；

控制方法：采血時規范操作，采集的血液勿用力震蕩，以防溶血；收集標本時采用無菌試管，經檢測后再低溫凍存；保存時間不宜過久，檢測時盡量采用新鮮標本；對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑，并放入37℃水中1 h，待充分凝固后再離心分離血清。

操作流程如下：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。

（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

（6）洗板，同（4）。

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。

（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。

（9）洗板，同（4）。

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

3-氯-2-羥基磺酸鈉  95%雙(2,2,6,6-四甲基-4-基)癸二酸酯 98%Anti-Phospho-MEF2A (Ser408) /FITC  熒光素標記化肌增強因子2抗體IgG

3-[(3-膽固)二甲基]-1-磺酸 98%4,4'-雙(4-氨苯氧基)聯苯 97%Anti-Megsin/SER—PINB7 /FITC  熒光素標記(或半胱)蛋白抑制劑B7抗體IgG

2-環己基乙磺酸 ≥99.5% (T)2,2-二(3--4-羥苯基)六氟烷 98%Anti-MEK1/ MAPKK 1/FITC  熒光素標記MEK1/ MAPKK 1抗體IgG

2-環己基乙磺酸 ≥99.0% (T)3,3',4,4'-聯苯四甲酸二酐 97%Anti-phospho-MEK1 (Thr286) /FITC  熒光素標記化絲裂原活化蛋白激激1抗體IgG

分子生物學級1,4-環己烷二羧酸(cis + trans) 99%Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser217/221)/FITC  熒光素標記化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體IgG

3-[(3-膽固)二甲基]-2-羥基-1-磺酸 99%2,2'-二羥基-4-甲氧基二苯甲酮 98%Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser221)/FITC  熒光素標記化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體IgG

3-(二丁) 97%4、4'-二苯酰替苯 98%Anti-Melamine/FITC  熒光素標記抗三聚抗體IgG

十二烷基基氯化銨 99%2,4-二羥基苯甲 98%Anti-Melamine/FITC  熒光素標記抗三聚抗體IgG

Hb血紅蛋白酶聯免疫試劑盒硫 BCBMP-4 ELISA Kit  大鼠骨成型蛋白4豚鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)聯免疫吸附測定試劑盒

白豚鼠Slit同源物2(Slit2)聯免疫吸附測定試劑盒

2,2－二氧烷 99%CCK-8(Rat cholecystokinin octapeptide) ELISA Kit  大鼠膽囊收縮素/縮膽囊素八肽豚鼠成纖維生長因子受體底物2(FRS2)聯免疫吸附測定試劑盒

L-異亮氨 99%COX-2(rat cyclooxygenase-2) ELISA KIT   大鼠環加氧2豚鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)聯免疫吸附測定試劑盒

非動物源，用于培養,98.5-101.0%, EP, JP, USPBDNF ELISA Kit  大鼠腦源性神經營養因子豚鼠內臟脂肪特異性絲氨蛋白抑制因子(VASPIN)聯免疫吸附測定試劑盒

L-亮氨 99%ACV-A ELISA Kit  大鼠活化素A豚鼠成纖維生長因子受體4(FGFR4)聯免疫吸附測定試劑盒

硫 USP級,680 I.U./mgANG- II ELISA Kit  大鼠血管緊張素Ⅱ豚鼠類胰蛋白(TPS)聯免疫吸附測定試劑盒

硫 分析標準品ACE ELISA Kit  大鼠血管緊張素轉化豚鼠封閉蛋白14(CLDN14)聯免疫吸附測定試劑盒

硫 USP級PF/PFP(Rat Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit  大鼠穿孔素豚鼠趨化素樣因子超家族成員5(CKLFSF5)聯免疫吸附測定試劑盒

L-纈氨 99%NKA ELISA Kit(Ret)  大鼠神經肽A豚鼠脂A1(PLA1)聯免疫吸附測定試劑盒

活性炭 AR，200目，粉末狀，褐色Rat Slit2 ELISA Kit  大鼠Slit2豚鼠表面活性物質關聯蛋白J(SPJ)聯免疫吸附測定試劑盒

活性炭 CP，200目，粉末狀，褐色NKB ELISA Kit(Ret)  大鼠神經肽B豚鼠肌肉糖原化(PYGM)聯免疫吸附測定試劑盒

活性炭顆粒 AR,20-50目Rat reduced glutathione,GSH ELISA Kit  大鼠還原型豚鼠堿性唾液脯氨豐富蛋白2(PRB2)聯免疫吸附測定試劑盒

活性炭 電鍍脫色，40-60目，from NutshellL-Selectin/CD62L ELISA Kit  小鼠L選擇素豚鼠角蛋白17(CK17/KRT17)聯免疫吸附測定試劑盒