操作步驟：
顯影粉袋哪里有賣(mài)切取含有目的DNA 片段的瓊脂糖凝膠條帶。
● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠，減少凝膠體積，提高DNA 回收率。
● 切膠時(shí)，請(qǐng)使用長(zhǎng)波長(zhǎng)UV （360 nm ）光盒。且不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外燈下，以防DNA 損傷。
2 稱(chēng)取凝膠的重量近似地確定其體積。
● 凝膠重量的稱(chēng)量方法：取.5 ml 離心管電子天平稱(chēng)初質(zhì)量，切膠裝在離心管后稱(chēng)終質(zhì)量，兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異，因此，每個(gè)離心管的重量需單獨(dú)稱(chēng)量。
3 按照每00 mg 瓊脂糖凝膠對(duì)應(yīng)00 µl 溶液BD 的比例，向離心管中加入溶液BD。
4 50 ℃水浴7-0min，直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
● 瓊脂糖必須*融化，以免堵塞柱子，嚴(yán)重影響DNA 段的回收效率。
● 如果總體積大于500 µl，可適當(dāng)增加溶膠時(shí)間。
● 若此時(shí)溶液變紅，可加0 µl 3M NaAC （pH 5.2）。
5 將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中，靜置2min 。
● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱，因?yàn)榧兓谳^高溫度時(shí)結(jié)合DNA 的能力較弱。
6 2,000 rpm 離心min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積，可分兩次離心，棄濾液。
● 此時(shí)DNA 被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7 加入500 µl 溶液BD。2,000 rpm, 離心min，棄濾液
8 加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm, 離心min，棄濾液。
● 溶液PE 初次使用前用無(wú)水乙醇按: 4 稀釋?zhuān)春?0% 乙醇。
● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫，以獲得高質(zhì)量DNA 段。
9 加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm, 離心min，棄濾液。
0 2,000 rpm 離心 3min ，以*去除純化柱中的液體。
● 此步驟的作用是去除殘留乙醇，避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DNA 段的充分溶解。
將離心柱置于新的.5 ml 離心管中。向純化柱的處，懸空滴加30-00 µl 溶液Eluent （60℃預(yù)熱），靜置2min 。2,000 rpm 離心min，管底即為目的DNA 段。貯存于-20℃。
● 溶液Eluent 可用無(wú)菌雙蒸水代替，但其pH 需為8.0-8.5，加入體積視DNA 目的段的多少、用戶(hù)對(duì)目的濃度要求而定。
● 對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱，會(huì)提高提取DNA 目的段的產(chǎn)量。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 價(jià)格 |
顯影粉袋哪里有賣(mài) | 袋 | 來(lái)電可享受優(yōu)惠 |
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注意事項(xiàng)：
顯影粉袋哪里有賣(mài)● 溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無(wú)水乙醇，即5 ml 溶液PE 中加入60 ml 無(wú)水乙醇，20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無(wú)水乙醇，使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類(lèi)沒(méi)有嚴(yán)格限制，可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率，希望使用高純度的Agarose ，但沒(méi)有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液，以免影響電泳及回收效果。
● 請(qǐng)適當(dāng)延長(zhǎng)電泳時(shí)間，在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收，以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率，切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小，或DNA 初始量少，回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent（0 mM Tris-HCl, pH 8.5）中不含EDTA，其收集的DNA 片段可直接用于各種酶促反應(yīng)等，不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率，請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的片段。
● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。
問(wèn)：常用的DNA 濃度及純度檢測(cè)方法有哪些？
顯影粉袋哪里有賣(mài)答：回收得到的DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過(guò)對(duì)比定量的Marker 來(lái)定量濃度；紫外分光檢測(cè)OD260/280 比值，OD260/280 比值在.7-.9 之間說(shuō)明所得 DNA 純度較好，如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水，比值會(huì)偏低，因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值，但不表示純度低。
問(wèn)：長(zhǎng)片段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問(wèn)題？
答：顯影粉袋哪里有賣(mài)當(dāng)DNA 片段長(zhǎng)度較長(zhǎng)（5 kb 以上）時(shí)，回收效率會(huì)有所下降，這是DNA 切膠回收時(shí)的常見(jiàn)現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問(wèn)題：
適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量；
2 由于長(zhǎng)片段DNA 不易從樹(shù)脂上洗脫下來(lái)，建議洗脫兩次，可以提高洗脫效率；
3 減少操作過(guò)程中對(duì)長(zhǎng)片段DNA 的物理?yè)p傷，如混合振蕩操作不要過(guò)于劇烈，切膠時(shí)不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外等下。
地骨皮甲素 CAS 75288-96-9 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg
橘葉 CAS 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 3g
二氫醉椒苫素 CAS 9902-9- 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： HPLC≥98%;0mg
橙黃決明素 ： 67979-25-3 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
CAS 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 00mg
黃腐酚 ： 6754-58- 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
白屈菜紅堿;Chelerythrine ： 3436-5-9 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
去甲基川陳皮素;Demethylnobi ： 274-59-6 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
牛磺膽酸鈉 CAS 45-42-6 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： HPLC≥97%;20mg
普羅寧 CAS 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 00mg
灰氈毛忍冬皂苷甲 CAS 40360-29-8 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格： 0mg
顯影粉袋哪里有賣(mài)真菌/酵母細(xì)胞線(xiàn)粒體分離（高純）試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：0次
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