人卵磷脂膽固醇酰基轉移酶ELISA試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中人(LCAT)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
[實驗原理]
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人(LCAT)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人(LCAT)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
[說明]
1.zui終的實驗結果與試劑的有效性、實驗者的相關操作以及當時的實驗環境密切相關,請務必準備充足的標本備份。
2.不同批次的同一產品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據試劑盒內說明書進行實驗操作,網站電子版說明書僅作參考。
3.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到*的檢測結果。
4.本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預留充足的樣本。
5.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質的引入導致ELISA實驗結果偏差。
6.若樣本為細胞培養上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態、細胞數量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
7.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
在實際操作中,除了挑選優良試劑外,有必要嚴厲依照操作過程進行操作,一起作好室內質控、室間質評,以謹慎的工作作風檢查每一份標本,才干確保檢查質量。ELISA試劑盒如今國內已有適當數量的單位具有全自動酶標儀,這關于完成ELISA規范化檢查、進步檢查質量起到了重要作用。
人卵磷脂膽固醇酰基轉移酶ELISA試劑盒實驗中遇到的問題解答
一、洗板
也許因素:
1) 選用手藝洗板,孔與孔之間液體穿插。 2) 選用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,致使洗板不*;洗板針阻塞,抽吸不*;洗板不暢,致使洗板作用差。 3) 反響板過多形成洗板等待時刻長。
解決辦法:
1) 確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
二、顯色
ELISA試劑盒也許因素:
1) 顯色劑制造后放置時刻過長或運用過期顯色劑; 2) 加顯色劑時濺起孔外形成液體回流。
解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前制造,堅持不bi過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不必; 2) 加樣時堅持顯色劑不外流; 3) A、B液應防止觸摸金屬器械。
三、停止
也許因素如加停止液時發生較多氣泡,致使假陽性添加。所以在加停止液時應防止發生氣泡。
四、讀板
ELISA試劑盒如讀板時板底不清洗等。應確保酶標板清洗。所以在全部操作過程中確保酶標板不觸摸次氯酸; 盡也許完成ELISA檢查規范自動化,有用進步檢查質量。
[注意事項]
1.嚴格按照規定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2.洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4.底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經變藍的底物液不能使用。
5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
9.不能使用過期產品。
10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。