實驗結果判斷我有妙招：
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3、以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性，P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑，P／N小于1．5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照，與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求：
① 易揮發、低燃點的試劑要密封，放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣，水發生反應的物質要密封，并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑，應將其固體或晶體密封保存，不宜長期存放其水溶液，亞硫酸，氫硫酸溶液要密封存放，鉀，鈉，白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存，其相應的溶液較固體更易反應，所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封，放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
抗壞血酸過氧化物酶（APX）測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6395 |
商品介紹：
測定意義: APX是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一，也是抗壞血酸代謝的關鍵酶之一。APX具有多種同功酶，分別定位于葉綠體、胞質、線粒體、過氧化物和乙醛酸體，以及過氧化體和類囊體膜上。APX 催化H2O2氧化AsA，是植 AsA 的主要消耗者。APX的活性直接影響到AsA的含量，APX與AsA具有一定的負相關性。 測定原理： APX 催化催化H2O2氧化AsA，通過測定AsA氧化速率，來計算得APX活性。 自備儀器用品： 低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、移液槍、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液：液體 100 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑一：液體 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑二：液體 15 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑三：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
試劑四：液體 3 mL×1 瓶，4℃保存。
操作步驟：
1. 樣品的準備：
a. 細胞樣品的準備：收集細胞，用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心，取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備：動物用生理鹽水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心，取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒（P1511）測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大，該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量，用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如，小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定，可以冰浴保存；如果當天不能完成測定，可以-70 ℃凍存，但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作：
a. WST-8酶工作液的配制： 參照下表，根據待檢測樣品(包括標準品) 數量，配制適量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
注意：由于酶溶液的用量較少且易沉降，必須注意在使用前先輕輕離心一下，然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制：將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻，按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋，即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存，可當天使用，但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備：需自備SOD標準品，用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升，參考樣品進行檢測。說明：為避免稀釋后SOD酶活性的下降， SOD標準品宜現稀釋現使用；本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品，但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pHY43 pHY43 低溫運輸，-20℃保存
鈉瓊脂基礎 NaHCO3 Agar Base 250g
1瓶 JEG-3細胞株 JEG-3 低溫運輸和保存
2.5L圓底立式厭氧培養袋 2.5L Round bottom vertical anaerobic culture bag 10個/包
200µg RecA蛋白 RecA -20℃保存
500mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.2M,pH7.6 Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH7.6 常溫保存
1 管 KM 71酵母菌 KM71 Yeast Strain -80℃保存
胰酪大豆胨液體培養基 (TSB)（顆粒） 250g
50mL RNA洗脫液 RNA Elution Buffer 常溫
2 ug pCMV6-AC-GFP pCMV6-AC-GFP 低溫運輸，-20℃保存
溴甲紫葡萄糖瓊脂 Bromcresol Purple Dextrose Agar 250g
抗壞血酸過氧化物酶（APX）測試盒微量法SPDYA 細胞周期G2/M期快速誘導蛋白SPDYA抗體 規格: 0.2mlMouse Anti-rabbit IgG/AP 堿性磷酸（AP）標記的小鼠抗兔IgG 規格: 0.1ml
Wnt6 信號通路Wnt6抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-Goat IgM/AP 堿性磷酸（AP）標記的兔抗羊IgM 規格: 0.1ml
GCN2 蛋白激GCN2蛋白抗體 規格: 0.2mlPRMT1 蛋白質甲基轉移1抗體 規格: 0.1ml
KLF8/KLF3 KLF樣轉錄因子8抗體 規格: 0.1mlHeparanase 乙酰肝素抗體 規格: 0.1ml
Phospho-Tuberin/TSC2(Ser540) 磷酸化結節性硬化蛋白抗體 規格: 0.1mlMAPK organizer 1/Morg1 絲裂原活化蛋白激組織蛋白1抗體 規格: 0.1ml
ANGEL1 ANGEL1蛋白抗體 規格: 0.2mlDonkey Anti-Goat IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的驢抗羊IgG 規格: 0.1ml
BRP44 腦蛋白44抗體 規格: 0.2mlFbx15 Fbx15蛋白抗體 規格: 0.2ml
Phospho-p90RSK(Ser380) 磷酸化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體 規格: 0.1mlPhospho-MAP3K8/Tpl2 (Ser400) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激8抗體 規格: 0.1ml
IL-14/Taxilin alpha 白介素14抗體 規格: 0.1mlDACH2 轉錄調節因子DACH2抗體 規格: 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的羊抗雞IgG 規格: 0.1mlphospho-P53(Ser46) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規格: 0.1ml
FAM96B FAM96B蛋白抗體 規格: 0.2mlIGFBP1 胰島素樣生因子結合蛋白1抗體 規格: 0.1ml
SCYLV 甘蔗SCYLV抗體 規格: 1mlPhospho-Tuberin/TSC2(Ser664) 磷酸化結節性硬化蛋白抗體 規格: 0.1ml
