FITC-xtra 異硫氰酸熒光素是美國AAT Bioquest生產的熒光素，雖然FITC是用于制備綠色熒光生物共軛物的zuiliuxing的熒光標記染料，但是FITC存在某些限制，例如用于顯微鏡成像的嚴重光漂白和pH敏感熒光。與相應的FITC綴合物相比，用FITC-xtra制備的蛋白質綴合物是非常優秀的。FITC-xtra綴合物比FITC綴合物明顯更亮，并且更加光穩定。另外，FITC-xtra的熒光不受pH（4-10）的影響。這種pH不敏感性是對FITC的重大改進，FITC僅在pH大于9時才發出其zuida熒光，FITC-xtra具有幾乎相同FITC的光譜特性。此外，FITC-xtra在溫和綴合條件下比FITC產生高得多的綴合產率。像5-FITC，FITC-xtra抗體綴合物適合于488nm激光線的激發，使其成為相應的FITC標記的抗體綴合物的替代物。在檢測條件相同的情況下，FITC-xtra抗體綴合物提供比相應的FITC標記的綴合物高得多的信號/背景比。
1.準備蛋白質儲備溶液（溶液A）：
將100μL反應緩沖液（例如，1M碳酸鈉溶液或1M磷酸鹽緩沖液，pH~9.0）與900μL目標蛋白溶液（例如抗體，蛋白質濃度> 2 mg / ml，如果可能）混合，得到1 mL蛋白標記儲備液。
注1：蛋白質溶液（溶液A）的pH值應為8.5±0.5。如果蛋白質溶液的pH低于8.0，則使用1Mtansuanqingna溶液或1M pH 9.0磷酸鹽緩沖液將pH調節至8.0-9.0的范圍。
注2： 應將蛋白質溶于pH7.2-7.4的1X磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）中。如果蛋白質溶解在Tris或ganansuan緩沖液中，則必須用pH7.2-7.4的1X PBS透析，以除去用于蛋白質沉淀的游離胺或銨鹽（例如硫酸銨和乙酸銨）。
注3：若使用不純的抗體、牛血清蛋白（BSA）和明膠穩定的抗體，則標記效果不會特別好。diedanhuana或硫柳汞的存在也可能干擾綴合反應。可以通過透析或旋轉柱除去diedanhuana或硫柳汞，以獲得zuijia標記結果。
注4：如果蛋白質濃度小于2mg / mL，則綴合效率明顯降低。為獲得zuijia標記效率，建議最終蛋白質濃度范圍為2-10 mg / mL。
注3：若使用不純的抗體、牛血清蛋白（BSA）和明膠穩定的抗體，則標記效果不會特別好。diedanhuana或硫柳汞的存在也可能干擾綴合反應。可以通過透析或旋轉柱除去diedanhuana或硫柳汞，以獲得zuijia標記結果。
注4：如果蛋白質濃度小于2mg / mL，則綴合效率明顯降低。為獲得zuijia標記效率，建議最終蛋白質濃度范圍為2-10 mg / mL。
