071748 沙門氏菌生化鑒定盒(10種×10次)(SN標準)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
注意:生化管,應盡量將膠塞套緊,以免揮發造成假陽性!。(如果發現生化鑒定管的顏色由淺黃色變為深褐色
或黑色即為變質,不能繼續使用)
三)沙門氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法
沙門氏菌為需氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌,有動力,有周鞭毛(但有無動力的變種),溫度為37℃,pH為7.2~7.6,
在固體培養基上37℃ 24h~48h菌落可呈中等大小,光滑,圓形,濕潤,隆起,在液體培養基內生長均勻渾濁。
挑取平板分離的可疑菌落直接進行三糖鐵瓊脂和營養瓊脂培養,將可疑菌落置于已配備的無菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內托的凹槽內(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養箱中培養,結果觀察見表1。
注意:如有特殊的接種方式、培養時間或培養方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
四)沙門氏菌生化鑒定特征
自選擇性瓊脂平板上直接挑取至少2個典型或可疑菌落,分別用接種針接種賴氨酸脫羧酶培養基或尿素酶瓊脂一管,接種后無須
滅菌接種針,直接再接種三糖鐵瓊脂一管于37℃培養24±2h。按表2或表3結果進行判斷。
將符合表2 或表3 可疑沙門氏菌屬特性的三糖鐵瓊脂培養物,接種于普通肉湯中37℃培養18-24h 或用0.85%無菌生理鹽水
稀釋至5McFarland (約109cfu/mL), 各吸取0.05-0.08mL(約1~2 滴)的肉湯培養物或菌懸液加入每種微量生化管內。按表4
進行生化試驗(表中賴氨酸脫羧酶試驗或尿素試驗的結果見表2 或表3 的結果,不再另做。)