CytoFix 線粒體紅色探針是一種可獨立于線粒體膜電位梯度而選擇性地對線粒體進行染色的染料。 由于此功能,即使固定后,該探針也可以很好地保留在線粒體中。 染料會滲透完整的活細胞,并被活細胞捕獲。 它的主要特征包括高染色效率,固定后可長時間保留在細胞內,并減少了人工操作時間。 該探針可與GFP表達的細胞一起使用,而不會重疊GFP的熒光,使其可用于多重分析。 它既可用于懸浮細胞,也可用于貼壁細胞,并易于適應各種熒光平臺。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優質的CytoFix 線粒體紅色探針。
適用儀器
熒光顯微鏡 | |
Ex: | Cy3/TRITC濾波片組 |
Em: | Cy3/TRITC 濾波片組 |
推薦孔板: | 黑色透明底板 |
濾波片: | Cy3/TRITC 濾波片組 |
樣品實驗方案
簡要概述
在生長培養基中準備細胞
用CytoFix MitoRed工作溶液在37°C孵育細胞20-30分鐘
去除CytoFix MitoRed工作溶液
用甲醛固定細胞(可選)
在熒光顯微鏡下用Cy3 / TRITC濾光片組進行分析
溶液配制
工作溶液配制
將20 µL的儲備溶液加到10 mL的Hanks和20 mM Hepes緩沖液(HHBS)或自備緩沖液或細胞培養基中,并充分混合。
注意:20 µL儲備液足以進行一次96孔板分析。 可以根據特定的細胞類型和細胞或組織對探針的滲透性來改變染色條件。
注意:未使用的CytoFix MitoRed儲備溶液可以分裝,并在≤-20°C下以較小的等分試樣存儲。 避光并避免重復的凍融循環。
實驗步驟
1.在生長培養基中制備細胞。
2.加入100 µL /孔(96孔板)或50 µL /孔(384孔板)的CytoFix MitoRed工作溶液。
(注意細胞膜探針的濃度因具體應用而異。)
3.避光保存,在37°C下孵育細胞20-30分鐘。
4.除去每個孔中的工作溶液。 用HHBS或自備緩沖液洗滌細胞。(可選的)
5.可選:在室溫下用4%多聚甲quan 溶液將細胞固定20-30分鐘。 洗滌兩次以除去固定液。
6.使用帶有Cy3 / TRITC濾光片組的熒光顯微鏡觀察細胞中的熒光信號。