1、原理及適用范圍
大腸菌群是評價食品衛生質量的重要指標之一,目前已被廣泛應用于食品衛生檢驗工作中。大腸菌群多存在于溫血動物糞便、人類經?;顒拥膱鏊约坝屑S便污染的地方,大腸菌群數的高低,表明了食品及食品生產過程中受污染的程度。大腸菌群測試片(FilmplateTM Enumeration of Coliform BE211)含有選擇性培養基、大腸菌群特異性半乳糖苷酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品。本產品適合于食品、飲用水及原料中大腸菌群的計數,也可用于食品加工設備表面的衛生檢測。執行標準:食品安全國家標準 食品微生物學檢驗大腸菌群計數(GB 4789.3)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液。
2.2、接種:一般食品選2~3個適宜的稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進行檢測。將大腸菌群測試片置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固。每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、計數原則及報告方式
3.1、培養后紙片上的藍色菌落為大腸菌群菌落,選擇菌落數在15CFU~150CFU之間的紙片進行計數。
3.2、若兩個稀釋度的菌落數均在15CFU~150CFU之間,則取其平均菌落數乘以稀釋倍數報告之,即為每毫升(或每克)樣品中的大腸菌群菌落數。
3.3、如果所有稀釋度的測試片上的菌落數都小于15CFU,則計數稀釋度的測試片上的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。
3.4、如果所有稀釋度的測試片上均無菌落生長,則以小于1乘以稀釋倍數報告之。
3.5、如果稀釋度的測試片上的菌落數大于150CFU個時,計數稀釋度的測試片上的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。計數菌落數大于150CFU的測試片時,也可計數一個或兩個具有代表性的方格內的菌落數,換算成單個方格內的菌落數后乘以20(紙片生長面積為20cm2)即為測試片上估算的菌落數。報告單位以CFU/mL(或CFU/g)表示。
4、附加說明
4.1、大腸菌群測試片不但可以大大縮短檢測時間,而且檢測結果與傳統方法很接近,符合率可達90%左右。
4.2、樣品勻液的pH值應在 6.5~7.5之間,必要時用1mol/L氫氧化鈉(NaOH)或1mol/L鹽酸(HCl)調pH。
5、保存條件
本產品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水,在拆封前將整包回溫至室溫。