大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA Kit

（一）雙抗體夾心法
雙抗體夾心法：是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下：
（1）將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體：洗滌除去未結合的抗體及雜質。
（2）加受檢標本：使之與固相抗體接觸反應一段時間，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合，形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
（3）加酶標抗體：使固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
（4）加底物：夾心式復合物中的酶催化底物成為有色產物。根據顏色反應的程度進行該抗原的定性或定量。
根據同樣原理，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物，即可用雙抗原夾心法測定標本中的抗體。
操作步驟
1.    標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為9U/L，6U/L，3U/L，1.5U/L，0.75U/L）。
2.    加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.    溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.    配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
5.    洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
6.    加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7.    溫育：操作同3。
8.    洗滌：操作同5。
9.    顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.    終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11.    測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行
每個試劑盒操作是不同的，請按說明書操作。具體事項請！
上海友騰生物傾力為客戶提供上萬種科研試劑，提供*、zui全、zui有效的科研試劑產品，質量被全國各大院校科研機構認可。
 鄭重聲明：請客戶在取材前盡量先與我公司銷售技術人員溝通，前期的取材直接影響到您的實驗結果。我們有成套的售前售后服務，.凡是購買公司試驗用產品，本公司無償提供。凡是購買本公司elisa試劑盒，本公司免費代測，產品優質耐用，性價比好，值得信賴。
服務承諾：1.凡在本司購買elisa試劑盒的客戶，可享受我司提供免費代測服務及中英文雙版說明書
          2.我司對售出產品提供完整售后服務,本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
本公司*供應科研用elisa試劑盒，價格合理，確屬質量問題可包換包退，免除您的后顧之憂。，如有問題可與我司業務員!我們會以zui快的速度為你解決一切問題，
提供各種種屬、各種系列ELISA試劑盒，*于實驗室科學研究用，不適用于臨床診斷。提供免費代測服務，詳情請您。 傳真  手機