優(yōu)質(zhì)的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。 

犬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒技術(shù)參考實(shí)驗(yàn)-標(biāo)本的采取和保存

　　可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

犬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒技術(shù)參考實(shí)驗(yàn)-標(biāo)本的采取和保存

　　血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。如在冰箱中保存過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，超過(guò)一周測(cè)定的需低溫冰存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾，澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落，所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè)，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作，也可加入適當(dāng)防腐劑。

洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。ELISA就是靠洗滌來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過(guò)洗滌以清除殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)。可以說(shuō)在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌，不得馬虎。

犬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒技術(shù)參考實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)，洗滌：洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動(dòng)洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過(guò)程如下：

　　（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液；b.用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去）；c.浸泡，即將洗滌液注滿(mǎn)板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動(dòng)，浸泡時(shí)間不可隨意縮短；d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復(fù)操作c和d，洗滌3-4次（或按說(shuō)明規(guī)定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數(shù)或延長(zhǎng)浸泡時(shí)間。

　　微量滴定板多采用浸泡式洗滌法。洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，從而削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài)，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。

　　（2）流水沖洗式 流水沖洗法zui初用于小珠載體的洗滌，洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖洗2分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更為*，且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明，流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔表面，洗滌效果更佳。

犬血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子A(VEGFA)檢測(cè)試劑盒技術(shù)參考相關(guān)產(chǎn)品展示：hz-1974E    人中期因子(MK)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1975E    人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1976E    人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1977E    人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1978E    人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1979E    人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA試劑盒     血清/組織/尿液
hz-1980E    人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1981E    人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1982E    人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1983E    人P53(P53)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1984E    人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1985E    人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA     血清/組織/尿液
hz-1986E    人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1987E    人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1988E    人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1989E    人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1990E    人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1991E    人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1992E    人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1993E    人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1994E    人胃癌標(biāo)志物ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1995E    人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1996E    人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1997E    人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1998E    人乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-1999E    人卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2000E    人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2001E    人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2002E    人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2003E    人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2004E    人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2005E    人抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2006E    人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒     血清/組織/尿液
hz-2007E    人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2008E    人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2009E    人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒     血清/組織/尿液
hz-2010E    人肺炎支原體抗體(MP-Ab)ELISA Ki    血清/組織/尿液
hz-2011E    人肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒     血清/組織/尿液
hz-2012E    人肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液
hz-2013E    人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒    血清/組織/尿液