總多糖含量測試盒_糖代謝系列
測定方法:分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
多糖是生物體中廣泛存在的物質(zhì),是一類由醛糖或酮糖通過糖苷鍵連接而成的天然高分子多聚物,它是生物體內(nèi)重要的生物大分子,是維持生命活動正常運轉(zhuǎn)的基本物質(zhì)之一。
總多糖含量測試盒_糖代謝系列
測定原理:
利用水提醇沉法提取總多糖,苯-酚-硫酸法測定總多糖含量。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、無水乙醇、濃硫酸、蒸餾水、水浴鍋。
試劑的組成和配制:
試劑一:12mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:無水乙醇,自備;
試劑三:濃硫酸,自備。
總多糖提取:
樣本烘干粉碎,稱取約0.05g樣本,加入1mL水,充分勻漿。100℃水浴提取2h(必須蓋緊蓋子防止水分流失),冷卻后10000g離心10min,取上清。吸取0.2mL上清,慢慢加入0.8mL無水乙醇,混勻后4℃靜置過夜,10000g離心10min,棄上清,沉淀中加入1mL水,充分混勻溶解沉淀。
測定步驟:
1、分光光度計預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至490nm,蒸餾水調(diào)零。
2、吸取400µL上清,加入200µL試劑一和1mL濃硫酸,混勻后90℃水浴20min,流水冷卻。取1mL加入比色皿,于490nm下測定吸光值A。