氮代謝系列_谷-氨酰胺酶(GLS)測試盒
測定方法:微量法
產品規格:100管/96樣
注 意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
GLS(EC 3.5.1.1)是酰胺基水解酶,催化天冬酰胺水解成谷-氨酸和氨,在氮素代謝中具有重要調控作用,尤其是調節游離氨含量和尿素代謝。
氮代謝系列_谷-氨酰胺酶(GLS)測試盒
測定原理:
GLS催化谷-氨酰胺水解成L-谷-氨酸和氨,利用奈氏試劑檢測氨增加的速率,即可計算其酶活性。
需自備儀器和用品:
臺式離心機、酶標儀、96孔板、可調式移液槍、研缽、冰和雙蒸水。
試劑組成和配制:
試劑一×2瓶,60 mL,4 ℃保存;
試劑二×1瓶,40 mL,4 ℃保存;
試劑三×1瓶,60 mL,常溫保存;
試劑四×1瓶,5 mL,常溫保存;
試劑五×1瓶,3 mL,常溫保存;
試劑六×1瓶,3 mL,常溫避光保存。
粗酶液提取:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。