土壤酸性磷酸酶(soil acid phosphatase S-ACP)活性
測定試劑盒說明書
For Research Use only
僅供研究用
貨號:QYS-235098
分光光度法 50 管/48 樣
注意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定
測定意義
土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 顯著影響,根據zui適 pH 范圍,通常分為酸性、中性和堿性三種類型。
測定原理
酸性環境中 S-ACP 催化磷酸苯二鈉水解生成*和*,通過測定酚的生成 即
算出 S-ACP 活性。
自備儀器和用品
見分光光度光度計、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、1mL 玻璃比色皿、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。
試劑組成和配制
N
粗酶液提取:
稱取風化混勻土壤約 0.1g,加入 50µL 甲苯(自備),輕搖 15min;加 0.4mL 試劑一并且搖勻后,置于 37℃恒溫培養箱,開始計時,催化反應 24h;到時后迅速加入 1mL 試劑二充分混勻, 以終止酶催化的反應。8000g,25℃離心 10min,取上清液置于冰上待測。
測定步驟
1.分光光度計預熱 30 min,調節波長到 660 nm,蒸餾水調零。
2.空白管:取1mL 玻璃比色皿,加入 50 µL 蒸餾水,100 µL 試劑三,20 µL 試劑四,充分混勻, 顯色后再加蒸餾水 830 µL,混勻后 25℃靜置 30 min,于 660 nm 測定吸光度,記為 A空白管。
3.標準管:取1mL 玻璃比色皿,加入 50 µL 標準液,100 µL 試劑三,20 µL 試劑四,充分混勻, 顯色后再加蒸餾水 830 µL,混勻后 25℃靜置 30 min,于 660 nm 測定吸光度,記為 A標準管
4.測定管:取1mL 玻璃比色皿,加入 50 µL上清液,100 µL 試劑三,20 µL 試劑四,充分混勻, 顯色后再加蒸餾水 830 µL,混勻后 25℃靜置 30 min,于660 nm 測定吸光度,記為 A測定管。
注意 空白管和標準管只需測定一次
S-ACP 活性計算公式
N
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