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上海一研生物科技有限公司
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ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書

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更新時(shí)間:2019-01-22 08:48:18瀏覽次數(shù):1439次

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ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書

Mouse ApoB100 ELISA Kit

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小鼠載脂蛋白B100(ApoB100)DRGelisa試劑盒 Mouse ApoB100 ELISA Kit
ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書【實(shí)驗(yàn)用途】S-100蛋白是一組低分子量的鈣結(jié)合蛋白,因其在中性飽和硫酸銨中溶解而得名。目前,共發(fā)現(xiàn)約20種結(jié)構(gòu)與功能相似、存在于不同組織、可調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外Ca2+的S-100蛋白。其中S-100B蛋白是一種分子量為21 ku的酸性蛋白,其為由2個(gè)β亞單位組成的二聚體,經(jīng)腎臟清除,半衰期約2 h;它在腦組織中含量豐富,遠(yuǎn)高于其他組織。S-100B具有廣泛的生物學(xué)活性,在細(xì)胞增生、分化、基因表達(dá)、細(xì)胞凋亡中具有重要作用,但其生理意義尚未*闡明。正常情況下,S-100B蛋白不能通過血-腦屏障進(jìn)入血液,但在一些病理情況下可檢測(cè)到血清S-100B升高。目前,關(guān)于S-100B蛋白通過血-腦屏障的確切機(jī)制仍不清楚。研究表明:S-100B可作為惡性色素瘤的輔助診斷和療效評(píng)價(jià)指標(biāo),以及一些神經(jīng)系統(tǒng)疾病的檢測(cè)指標(biāo)。近年來(lái),S-100B被廣泛應(yīng)用于評(píng)價(jià)腦外傷、腦出血、缺血性腦血管病、麻醉、休克等引起的腦損傷。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)(biotin)標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
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操作流程:
(1)ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
pDdGal-17(pDdGal17)  *

pDendra2  *

pDendra2-C(pDendra2C)  *

pDendra2-N(pDendra2N)  *

pDest-544(pDest544)  *

pDEST10  *

pDEST15 Gateway(pDEST15Gateway)  *

pDEST17(60908-2416)  *

pDEST20(60908-2417)  *

pDEST22 (60908-2418)  *

pDEST26  *

pDEST27  *
[Ile-Ser]-Bradykinin (T-Kinin)Ile-Ser-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg

[Leu116]-Prepro-Neuromedin U (104-136) (human)Phe-Leu-Phe-His-Tyr-Ser-Lys-Thr-Gln-Lys-Leu-Gly-Leu-Ser-Asn-Val-Val-Ser-Ser-Val-Val-His-Pro-Leu-Leu-Gln-Leu-Val-Pro-His-Leu-His-Glu

[Leu13] Motilin, human, porcinePhe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Gly-Gln

[Leu144, Arg147]-PLP (139-151), [L144, R147-PLP(139-151)]His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-Arg-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu144,Arg147]-Myelin Proteolipid Protein(139-151)Ser-His-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-Arg-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu144]-PLP (139-151), L144-PLP(139-151)His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-His-Pro-Asp-Lys-Phe

[Leu15]-Gastrin I (human)Pyr-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (13-36) (human, rat)Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (human, rat)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (porcine)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Leu-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

[Leu31,Pro34]-Peptide YY (human)Tyr-Pro-Ile-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Asn-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2
ApoB100 DRGelisa試劑盒說明書大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌DH10B感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌DH10B感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌DH10B電感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌DH10感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌DB3.1感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌DB3.1感受態(tài)細(xì)胞   *

大腸桿菌BL21感受態(tài)細(xì)胞   *

 

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