當前位置:上海一研生物科技有限公司>>科研細胞>>細胞系>> Hepa 1-6細胞,小鼠肝癌細胞規格
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%*(T25瓶),使*覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%*(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
下列是產品的訂購信息:
產品名稱 | Hepa 1-6細胞,小鼠肝癌細胞規格 |
英文名稱 | Hepa 1-6 cells, mouse hepatoma cells |
貨號 | EY-X64096 |
細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。
?
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷 CAS 113443-70-2 規格:HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
脫氫醋酸鈉;純品型;標準品;有證書-脫氫 CAS 4418-26-2 規格:0.1g 訂購|咨詢
甘草酸銨 CAS 53956-04-0 規格:HPLC≥98%,20mg/vial 訂購|咨詢
* CAS 規格:100mg 訂購|咨詢
原七葉皂苷元;Protoaescigen CAS 20853-07-0 規格:20mg 訂購|咨詢
24-乙酰澤瀉醇F CAS 規格:HPLC≥97%;5mg 訂購|咨詢
長春堿 CAS 865-21-4 規格:HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
* CAS 規格:100mg 訂購|咨詢
β-蛻皮激素;Hydroxyecdyso CAS 5289-74-7 規格:20mg 訂購|咨詢
乙酰纈草三酯;Acevaltratum CAS 規格:20mg 訂購|咨詢
L-* CAS 56-86-0 規格:20mg 訂購|咨詢
Hepa 1-6細胞,小鼠肝癌細胞規格膠質細胞源性神經營養因子抗原GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 0.5mg
凝溶膠蛋白抗原Gelsolin 0.5mg
綠色熒光蛋白GFP 0.5mg
綠色熒光蛋白GFP 0.5mg
糖皮質激素誘導腫瘤壞死因子受體抗原GITR (glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor) 0.5mg
胰高血糖素樣肽-1(多肽)GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide 0.5mg
下游轉錄因子Gli1蛋白抗原GLI1(GLI-Kruppel family member 1) 0.5mg
胰高血糖素樣肽-1(多肽)GLP-1 peptide 0.1mg
葡萄糖轉運蛋白3抗原GLUT3(Glucose transporter 3) 0.5mg
粒細胞-巨噬細胞克隆刺激因子抗原GM-CSF(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factors) 0.5mg
糖蛋白A33(跨膜)抗原GPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 0.5mg
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,環保在線對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。