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細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞;STO費用
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 STO是一株繼代生長的胚成纖維細胞系,可用于制備飼養層細胞(feeder layers)和其他研究。
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C4
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
小鼠胚胎成纖維細胞;STO費用在運輸的過程中,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產品的狀況,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要立即打開培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱過夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如果發現細胞仍不能貼壁,請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理;如若證實細胞無活力,請在收到貨后48小時內將細胞狀態反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
細胞培養步驟:
一.小鼠胚胎成纖維細胞;STO費用培養基及培養凍存條件準備:
1)準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項:
1.收到小鼠胚胎成纖維細胞;STO費用后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯絡。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質量規格:比活度:>20U/mg,BCN-HydroxysuccinimideN-羥基丁二酰亞胺(>98%,BR)
質量規格:>98%,BRN-HydroxyRiluzoleN-羥基*
質量規格:比活度:>5000U/mg,BCN-HydroxyNorfloxacinN-羥基*
質量規格:>98%,植物激素級N-GlycolylneuraminicAcidN-羥乙酰神經氨酸
質量規格:>98.0%,BRN-DesbutylBupivacaineN-去丁基*
質量規格:>97%,BiotechGradeN-DesmethylAzelastineN-去甲氮卓斯汀
質量規格:酶活:>50U/mg,進分N-Desmethyl-4'-hydroxyTamoxifenN-去甲基-4'-羥基它莫西芬
質量規格:>98%,分子生物學級N-Desmethyl-4-hydroxyTamoxifen(approx.1:1E/ZMixture)N-去甲基-4-羥基它莫西芬(大約1:1E/Z混合物)
pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro]PotassiumFerrocyanideTrihydrate20次
pGL4.37[luc2P/ARE/Hygro]PotassiumHydrogenPosphate20次
pGLucbasicPotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.020次
pGluePotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.220次
pGNPotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.4.20次
pGreen0029PotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.520次
pGRE-LucPotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH7.620次
pGreenPuro(CMV)PotassiumPhosphateSolution,0.2M,pH8.020次
pGRN145PotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.020次
pGro7PotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.220次
pGTf2PotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.420次
pGZPotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.520次
pHagcmv2PotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH7.620次
pHANNIBALPotassiumPhosphateSolution,0.5M,pH8.020次
pG-Tf2pOTB7FKBP420次
小鼠胚胎成纖維細胞;STO費用CACNB2 L-型電壓依賴型鈣通道β多克隆抗體 0.1ml
Cactin/C19orf29 19號染色體開放閱讀框29多克隆抗體 0.2ml
Cadherin 10 鈣粘附分子10多克隆抗體 0.2ml
Cadherin 8 鈣粘附蛋白8多克隆抗體 0.2ml
Cadherin 8 鈣粘附蛋白8多克隆抗體 0.2ml
Cadherin 9 鈣粘附蛋白9多克隆抗體 0.2ml
Cadherin like 23 鈣粘蛋白23多克隆抗體 0.2ml
CADM 4 細胞粘附分子4多克隆抗體 0.2ml
CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2 細胞粘附分子2 0.2ml
CADM3/IGSF4B 細胞粘附分子3多克隆抗體 0.2ml
CAGE1/CT3/CT95 腫瘤/抗原3多克隆抗體 0.2ml
CaIPLA2/PLA2G6 胞漿鈣獨立磷脂酶A2多克隆抗體 0.1ml
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