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ELISA 試驗時,注意事項如下:
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
產品名稱:油酰乙醇胺 ELIS檢測試劑盒
英文名稱: N-oleoyl ethanolamine
產品貨號:EY-E97871
產品規格:48T/96T
產品保存:2-8℃,有效期6個月
主要組成成分:試劑
性狀:液體
產品規格:96T/48T
96T指可以做94個標本,2個標準對照
48T指可以做47個標本,1個標準對照
96T-84個樣本
48T-42個樣本
待檢樣本:體液,血清,血漿,細胞培養上清液,尿液,組織勻漿,心房水標本等等。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
注意事項
1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7)底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
WORT瓊脂/WORT Agar用于真菌,特別是酵母菌的計數和增菌培養250克國產/進口
銀耳 Tremella fuciformis液化沙雷氏菌 Serratia liquefaciens
酸球菌脂亞種 Lactococcus lactis subsp. cremoris釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
白介素4(IL4)重組蛋白Recombinant Interleukin 4 (IL4)
三糖鐵瓊脂(TSI) 規格: 250g 用途: 用于鑒別腸道菌發酵蔗糖、糖、葡萄糖及產生硫化氫的生化反應
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
狗腎惡性組織細胞增生癥細胞DH82
嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus雜色云芝 Polystictus versicolor
Bolton肉湯配套試劑 規格: 10支/盒 用途: 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎中
Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細胞)5×106cells/瓶×2
克雷伯氏顯色培養基250克國產/進口
油酰乙醇胺 ELIS檢測試劑盒異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標準品) 質量規格:HPLC≥95%,標準品 Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside THP-1(人髓系白血病單核細胞)人腎細胞腺細胞
氨基葡萄糖鹽 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%,20mg/vial 基固羥化酶單加氧酶1抗體 SERINC4 ELISA Kit 絲氨組合因子4(SERINC4)ELISA試劑盒
巰咪唑(標準品) 質量規格:>98%,標準品 Methimazole 神經元特異性化酶(NSE)重組蛋白英文名稱:Recombinant Enolase, Neuron Specific (NSE)
非洲防己堿 規格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢 去腎上腺素(Noradrenaline) ELISA試劑盒通用96T31.2-2000 pg/mL大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)ELISA試劑盒,英文名:Smad 4 ELISA Kit
DIPSO.Na;3-[N-N-雙(2-羥基)氨基]-2-羥基丙單鈉鹽 質量規格:>98% DIPSO Monosodium 熱帶假絲酵母 Candida tropicalis地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
異甜菊 訂購|咨詢 規格: 10mg 補體C2抗體 17-α-OH ELISA Kit 17-α-羥化酶(17-α-OH)ELISA試劑盒
鹽哌侖西平 質量規格:>99%,BR Pirenzepine dihydrochloride 枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis節桿菌 Arthrobacter sp.
鹽地布卡因 質量規格:>98%,USP,BR Dibucaine HCl 沉默調節蛋白2(SIRT2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Sirtuin 2 (SIRT2)
構樹堿 訂購|咨詢 規格: HPLC≥98%,5mg/支 人髓脂相關糖蛋白(MAG)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠*受體(TR)ELISA試劑盒,英文名:TR ELISA Kit
木蘭花堿;Magflorine 訂購|咨詢 規格: 20mg 豬瘟病毒抗體 C4d ELISA Kit 補體片段4d(C4d)ELISA試劑盒
鹽羥胺 質量規格:AR Hydroxylammonium chloride CRT(人神經膠質瘤細胞)BC3H1(小鼠腦瘤細胞)
* 訂購|咨詢 規格: 100mg C型凝集素結構域家族4成員C抗體 calnexin ELISA Kit 鈣聯蛋白(calnexin)ELISA試劑盒
雙甘氨二肽 質量規格:>99%,BR Gly-Gly 不吸水鏈霉菌嶺變種 Streptomyces ahygroscopicus var. gongzhulinggensis植物桿菌 Lactobacillus plantarum
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