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淀粉總量檢測試劑盒庫號:M189312
參考價 | 面議 |
- 型號 型號:K-TSTA
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更新時間:2023-03-08 15:31:31瀏覽次數(shù):960
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淀粉總量檢測試劑盒庫號:M189312淀粉總量檢測試劑盒庫號:M189312
愛爾蘭Megazyme淀粉總量檢測試劑盒型號:K-TSTA
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淀粉測定方法可以分為酸水解法和酶法分析法。酸水解只能應用于純淀粉樣品。酶法分析方法在前處理步驟,淀粉凝膠化,液化和糊化,糊精水解成葡萄糖,葡萄糖測定步驟等方面存在不同。AACC法76-11詳細描述了淀粉在高壓蒸汽滅菌鍋中及含水的條件下凝膠化,并用淀粉葡糖苷酶將淀粉轉(zhuǎn)化為葡萄糖,再測定葡萄糖含量。AACC法76-11使很多樣品和材料的淀粉含量被低估,這些樣品包括高直鏈淀粉玉米淀粉和許多加工過得谷物制品。目前,很多方法在淀粉凝膠化的過程中后立即結(jié)束后加入耐熱α-淀粉酶處理。對于難以凝膠化的樣品如高直鏈淀粉玉米淀粉,采用氫氧化鈉或DMSO。在膳食纖維的測定方法中為取保淀粉完溶解,Englyst和Cumming(1988)加入了淀粉脫支化酶,普魯蘭酶。為了滿足樣品中總淀粉含量的定量測定的需要,Megazyme公司研發(fā)了一種使用耐熱α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶的淀粉總量試劑盒。這個方法已被AOAC和AACC采用。近來,我們改進了方法,使耐熱α-淀粉酶和淀粉葡糖苷酶孵育過程可以相同的pH(pH 5.0)下進行,可樣簡化了測定步驟,并將麥芽***糖生成的可能性降到低。Megazyme淀粉總量試劑盒可測定大部分食品,飼料,植物和谷物制品(天然或加工過的)。對于大部分樣品(如小麥粉),淀粉在樣品孵育中(大約100℃,并加入耐熱α-淀粉酶)完溶解。含有大量抗性淀粉的樣品(如高直鏈淀粉玉米淀粉),需要用2M KOH或熱DMSO進行預溶解。含有可溶性淀粉或麥芽糊精的樣品,不需要用耐熱α-淀粉酶處理。原理:耐熱α-淀粉酶水解淀粉為可溶性分支和無支的麥芽糊精(1)如有必要,樣品中的抗性淀粉可加入4℃的2M KOH并攪拌進行預溶解,并用醋酸鈉緩沖液中和,再用α-淀粉酶處理(2)。也可用100℃的DMSO溶解。淀粉葡糖苷酶(AMG)定量水解麥芽糊精成D-葡萄糖(3)D-葡萄糖被氧化成D-葡萄酸鹽,并釋放一摩爾H2O2,再通過過氧化物酶比色測定H2O2含量并產(chǎn)生昆亞胺染料。樣品中還有高含量的D-葡萄糖和麥芽糊精可在測定前用含水乙醇(80% v)。一個樣品可以在70分鐘完成。24個樣品可以在2小時內(nèi)完成。特異性,靈敏度,線性范圍和精確性這個分析可用于測定α-葡聚糖(包括淀粉,糖原,植物糖原和非抗性麥芽糊精)。小吸光度差異為0.10吸光度單位。這相當于當樣品體積為1.00 mL時,1.0 mg D-葡萄糖(或0.9 mg 淀粉)/樣品溶液L。檢測限為2.0 mg D-葡萄糖(1.8 mg淀粉)/L,這是在0.020的吸光度單位差異,大樣品體積為1.00 mL得到的。檢測的線性范圍為5-100 ug D-葡萄糖,同一樣品分別進行兩次測定,其吸光度值會有0.005-0.010吸光度單位的變化,這相當于樣品體積為1.00 mL時,樣品溶液中D-葡萄糖濃度0.05-1.0 mg/L。如果樣品是經(jīng)過稀釋的,在計算結(jié)果時候需要乘以相應的稀釋系數(shù)(F),如果在樣品制備階段,樣品是被稱量的,如10g/L,可能會產(chǎn)生0.02 到 0.05 g/100 g的差異。干擾:如果在實驗規(guī)定的時間內(nèi)(大約5分鐘)完成D-葡萄糖轉(zhuǎn)化過程,通常認為沒有干擾發(fā)生。這個也可以進一步驗證,通過在實驗的完成時,向比色皿中加入D-葡萄糖(0.1mL中加入50 ug),吸光光度值有會明顯增加。通過加入內(nèi)標物可以對樣品中的干擾物質(zhì)進行鑒定。定量回收試驗:通過向樣品中添加內(nèi)標物,計算樣品在處理和提取時的損失。如:在初的提取步驟時加入D-葡萄糖
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