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廣東環凱生物科技有限公司
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071770副溶血性弧菌細菌生化鑒定盒(15種×5次)一)整套試劑及用品鑒定生化反應的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5McFarland的濁度管、10支一次性吸管
071770 副溶血性弧菌細菌生化鑒定盒(15種×5次)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶0.5 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)西林瓶的使用方法
開啟西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)副溶血性弧菌生化鑒定盒的詳細使用方法
副溶血性弧菌為革蘭氏陰性無芽胞桿菌，易呈多形態，有棒狀、弧狀、卵圓狀、球狀、絲狀等，排列不規則，一般大小為0.3～0.7µm×1～2µm，單端一根鞭毛，有動力，運動活潑，兩端濃染，在固體培養條件下能生長周鞭毛。菌落常為隆起，圓形，稍渾濁不透明，表面光滑，濕潤，不產生色素。
挑取平板分離的可疑菌落劃線接種3%NaCl胰蛋白胨大豆瓊脂平板35－37℃培養18－24h，革蘭氏染色鏡檢，并將新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中，與0.5 McFarland的濁度管比濁，將菌懸液制備成0.5McFarlａnd ( 約108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（約0.06mL）菌懸液加入每種微量生化管內。將已接種的西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞（如圖2左兩瓶所示），特殊情況在下表注明采用半加塞（如圖2右兩瓶所示），直立于內托的凹槽內（如圖2），或放置于合適的瓶架中，于35－37℃培養箱中培養，結果觀察見表1。
注意：如有特殊的接種方式、培養時間或培養方式，請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
表一
產品名稱 | 結果判定 | 結果觀察 時間（小時） | 使用說明 | |
陽性 | 陰性 | |||
氧化酶試劑 | 藍紫色 | 不變色 | 30秒內 | 滴加1滴試劑到一小塊潔凈濾紙上，以剛剛浸濕為宜；用玻棒或接種環（鉑或塑料）挑取適量新鮮菌苔涂在紙片上。 |
3％NaCl半固體 | 擴散生長 | 無擴散生長 | 24—48 | 用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種，豎立培育。 |
無鹽胨水、3％NaCl胨水、6％NaCl胨水、8％NaCl水、10％NaCl胨水 | 生長 | 不生長 | 24 |
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3%NaCl、 3％NaCl蔗糖 3％NaCl乳糖 | 黃色 | 紫色 | 8－24 |
|
3％NaCl葡萄糖（產氣） | 黃色，小倒管有氣泡 | 紫色，小倒管無氣泡 | 18—24 | 使用前先確定倒管內無氣泡。 |
3%NaCl賴氨酸脫羧酶
| 試驗管綠色或黃綠色，對照管變黃 | 試驗管與對照管均變黃 | 18－24 | 每株被檢菌應同時接種氨基酸對照管一支，并加滅菌液體石蠟3－4滴覆蓋培養基表面。培養18－24小時，未見陽性結果，繼續培養4天，再做最終結果判定。 |
3%NaCl 葡萄糖磷酸鹽胨水（V-P） | 紅色 | 不變色 | 48 | 接種培養后依次加入8滴VP試劑甲液及4滴乙液，混勻，再培養10－20分鐘觀察結果。 |
β－半乳糖苷（ONPG） | 深黃色 | 淡黃色或無色 | 12－24 |
|
備注：本鑒定盒是按照環凱產品目錄中的品種成份從左到右的順序擺放。
四）副溶血性弧菌的生化特性見表2
表2 副溶血性弧菌的生化性狀
試驗項目 | 結果 |
革蘭氏染色鏡檢 | 陰性，無芽胞，呈棒狀、弧狀、卵圓狀 |
氧化酶 | + |
3%NaCl半固體 | 穿刺接種處擴散生長，有動力 |
無鹽胨水 | －或微弱生長 |
8% NaCl胨水 | + |
10％NaCl胨水 | －或微弱生長 |
蔗糖 | - |
乳糖 | - |
葡萄糖 | + |
分解葡萄糖（產氣） | - |
+ | |
賴氨酸脫羧酶 | + |
硫化氫 | - |
V-P | － |
ONPG | － |
表3 副溶血性弧菌主要性狀與其他弧菌的鑒別（必要時做，本鑒定盒沒有提供整套相應的生化管，需另買單盒)
名稱 | 氧化酶 | 賴氨酸 | 明膠 | 脲酶 | V ︱P | 蔗糖 | D︱纖維二糖 | 乳糖 | 阿拉伯糖 | D︱甘露糖 | D︱ | ONPG | 嗜鹽性試驗 NaCl含量（％） | |||||||
0 | 3 | 6 | 8 | 10 | ||||||||||||||||
副溶血性弧菌 | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | V | － | ＋ | － | V | － | ＋ | ＋ | ＋ | － | － | ＋ | ＋ | ＋ | － |
創傷弧菌 | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | － | － | ＋ | － | ＋ | ＋ | － | ＋ | V | ＋ | － | ＋ | ＋ | － | － |
溶藻弧菌 | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | ＋ | － | － | － | ＋ | ＋ | － | － | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ |
霍亂弧菌 | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | － | V | ＋ | ＋ | － | － | － | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | － | － | － |
擬態弧菌 | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | － | － | ＋ | － | － | － | － | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | － | － | － |
河弧菌 | ＋ | － | ＋ | － | ＋ | － | － | V | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | V | － |
弗氏弧菌 | ＋ | － | ＋ | － | ＋ | － | － | － | ＋ | － | － | ＋ | ＋ | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | ＋ | － |
梅氏弧菌 | － | ＋ | ＋ | － | ＋ | － | ＋ | V | ＋ | － | － | － | ＋ | ＋ | ＋ | － | ＋ | ＋ | V | － |
霍利斯弧菌 | ＋ | － | － | － | － | － | － | nd | － | － | － | ＋ | ＋ | － | － | － | ＋ | ＋ | － | － |
注：nd 表示未試驗;V表示可變。
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