抗氟離子酸性磷酸酶檢測試劑盒檢測緩沖液———————————15ml

顯色底物————————————2管

氟離子溶液———————————1ml

p-nitrophenol溶液(10mM)—————0.1ml

反應終止液———————————20ml

酸性磷酸酶也稱酸性磷酸酯酶，在酸性條件下可以催化磷酸酯鍵的水解。酸性磷酸酶是一個蛋白家族，哺乳動物中其分子量從18kD到100kD不等。酸性磷酸酶主要分為兩類，一類為抗酒石酸酸性磷酸酶，一類為抗氟離子酸性磷酸酶。

抗氟離子酸性磷酸酶包括在絕大多數細胞的溶酶體中表達的溶酶體酸性磷酸酶、前列腺、腦、肝臟、脾臟和血小板中表達的酸性磷酸酶。抗氟離子酸性磷酸酶在前列腺中的表達水平非常高，當前列腺發生癌變并出現轉移時抗氟離子的前列腺特異性酸性磷酸活性水平高。當前列腺發生病變時會導致血液中抗氟離子酸性磷酸酶活性顯著升高。同時，血液中檢測到抗氟離子酸性磷酸酶活性升高時，通常是前列腺發生病變。因此，血清或血漿中抗氟離子酸性磷酸酶活性水平的升高，常被用作前列腺癌等前列腺病變的指標。溶酶體儲存性疾病如Gaucher's disease等，也會導致血液中抗氟離子酸性磷酸酶活性水平一定程度的升高。

Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一種常用的磷酸酶顯色底物，在酸性條件下，可在酸性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol。para-nitrophenol (p-nitrophenol)在堿性條件下，呈黃色產物，可以在400-415nm檢測吸光度。產物黃色越深，說明酸性磷酸酶檢活性越高，反之則酶活性越低。據此通過比色分析就可以計算出酸性磷酸酶活性水平。在適量的氟離子存在的情況下進行酸性磷酸酶的活性檢測，檢測得到的酸性磷酸酶活性就是抗氟離子酸性磷酸酶活性。

注意事項;

1. 如果希望進行酶活性的定量，進行酶反應時必須注意精確計時。此時推薦采用孵育30分鐘等較長的時間，以減小操作過程中的時間誤差。同時如果樣品中酶活性較高，則可以預先適當稀釋樣品。

2. 樣品溶液中須避免出現各種酸性磷酸酶抑制劑。

3. 一管顯色底物配制后需當日使用完畢，因此請注意適當多準備一些樣品一起檢測，以避免試劑盒浪費。

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

細胞生物學研究的常用技術有哪些：

1.顯微技術：包括顯微觀察,顯微操作.

2細胞組分分析技術：離心分離技術,生物大分子定位技術,定量細胞化學分析技術.

3.細胞工程：細胞培養。

注意事項：

1. 本試劑盒的檢測試劑中含有螢光素酶，反復凍融會導致其逐漸失活。盡管經測試本試劑反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，為取得良好的使用效果，*次解凍后可適當分裝保存。反復凍融過程中，可能會導致檢測試劑中出現少量沉淀，此時宜平衡至室溫，并盡量溶解。如仍有殘留的不溶物，可以離心去除后使用，經測試不會影響后續的檢測效果。

2. 檢測時需使用白色或黑色的96孔板或384孔板。如果使用普通透明的96孔板或384孔板，相鄰孔之間會產生相互干擾。

3. 使用說明中提供了檢測ATP標準品的方法，實際檢測細胞活力時通常并不需要檢測ATP標準品。
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