W-TMB顯色試劑盒

英文名：W-TMB
相關類別：Western Blot    

儲存：常溫下運輸，收到后，將所有溶液2-8℃情況下保存，保質期為兩年。

規格：5次一盒

品牌：子科生物ZIKER

W-TMB顯色試劑盒概述：TMB全稱為3,3,5,5-四甲基聯苯胺，為無色物質，作為供氫體，在辣根過氧化物酶作用下被氧化，產生有藍色的產物，在特殊試劑的作用下沉淀在膜或組織片上，主要吸收峰在370 nm和652 nm，比色方便，是HRP結合物zui常用的底物。在免疫組織化學、原位雜交、Western Blot、Southern Blot等膜顯色中應用比較廣泛，也可以用于原位檢測細胞或組織內源性的過氧化物酶。本試劑是為免疫組化、原位雜交、Western Blot等膜顯色專門配制的，能夠使用5次，適合的膜大小為6 × 8 cm。儲存條件：2~8°C。
組份：底物溶液 A；底物溶液 B；緩沖液 C

W-TMB顯色試劑盒操作步驟：
1. 在免疫印跡實驗中,先將相應的HRP標記的二抗覆蓋膜，37℃震蕩器上震蕩1-1.5 Hour，再用TBST或者PBST洗滌膜3~4
次，zui后一次用TBS或PBS洗滌膜，將膜轉移到陰暗處。
2. 顯色前先將膜浸泡在10 mL的緩沖液C中10 min，再加入0.5 mL左右的底物溶液A和4μL底物溶液B，充分混勻。
3. 在陰暗處，在37℃的情況下，反應5-30 min，這時蘭色的產物條帶出現。
4. 照像記錄實驗結果。
注意事項：
1. 緩沖液C在使用前充分震蕩混勻。
2. 請在使用前按照上述比例配置所需溶液?，F配現用，如果有多余，當顏色變藍時，應該丟棄。
3. 請使用完后，將分析液A、分析液B和緩沖液C的蓋子旋緊，以防止溶液揮發和與空氣中的成分發生化學反應。
4. 如果所使用的膜較大，請適當增加所配試劑的量，以便*覆蓋膜。
5. 請正確配制western blot所需要的試劑，正確的膜轉移，抗體的稀釋和沖洗步驟，以保證能夠顯色和減少雜帶的產生。
6. 顯色一般在室外溫或37℃反應10-30 min，再延長反應時間，會使本底值增高，影響實驗結果的分析。
7. 本試劑只能夠用于體外實驗，不能夠用于臨床、治療和動物體內實驗等目的，由此產生的后果概不承擔責任。

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