人CD14分子(CD14)ELISA檢測試劑盒
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人CD14分子(CD14)ELISA檢測試劑盒的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應,并通過酶催化底物發生化學變化將抗原抗體反應通過顏色的形式顯現出來。
(1)將抗原抗體反應固相化:即試驗中的包被環節,使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結構,保持其生物學特性和免疫學活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應的特異性,因此,包被剩余的固相表面應該用抗原抗體反應無關蛋白封閉。一般認為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應:抗原或抗體在適當的介質下可進行特異的抗原抗體反應。 (4)酶反應:酶可以通過共價鍵與抗原或抗體連接形成結合物,當抗原抗體反應的時候,被檢測靶目標中也結合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應:結合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發生顏色反應,檢測人員可以裸眼觀察,可以通過顏色來判定是否有免疫反應的存在,通過顏色的深淺判斷標本中相應抗原或抗體的含量,也可借用酶標儀在適當的波長讀取吸光度值。
操作步驟
1、 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應在室溫(20-25℃)內進行。
2、 取出酶標板,按照標準品的次序分別加入50μl的標準品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品,空白對照加入50μl的蒸餾水;
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)
5、在各孔中加入100μl的酶標記溶液;(不含空白對照孔)
6、將酶標板用封口膠密封后,37℃孵育反應 1小時;(在孵育箱中保持穩定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標板洗滌后用吸水紙*拍干;
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對照孔)
11、各孔加入50μl終止液,終止反應;10、20-25℃下避光反應15分鐘;
結果判斷
1、30分鐘內在波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、以OD值為縱坐標,以標準品的濃度為橫坐標,繪制曲線圖;
3、根據樣品的OD值查找對應的濃度范圍;
免責聲明
- 試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
- 嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
大鼠免疫球蛋白G(IgG) ELISA Kit 96T 48T 1.23-100ug/mL 0.42ug/mL Rat Immunoglobulin G (IgG) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
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大鼠免疫球蛋白E(IgE) ELISA Kit 96T 48T 7.813-500ng/mL 2.8ng/mL Rat Immunoglobulin E (IgE) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
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小鼠免疫球蛋白A(IgA) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.071ng/mL mouse Immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit Mus musculus mouse
大鼠免疫球蛋白A(IgA) ELISA Kit 96T 48T 0.938-60ng/mL 0.37ng/mL Rat Immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
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大鼠血管細胞粘附分子1(VCAM1) ELISA Kit 96T 48T 12.5-800pg/mL 5.2pg/mL Rat Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
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大鼠堿性成纖維細胞生長因子(FGF2) ELISA Kit 96T 48T 12.35-1000pg/mL 4.37pg/mL Rat Fibroblast Growth Factor 2, Basic (FGF2) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
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小鼠組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1) ELISA Kit 96T 48T 78.125-5000pg/mL 27pg/mL mouse Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) ELISA Kit Mus musculus mouse
大鼠組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1) ELISA Kit 96T 48T 0.156-10ng/mL 0.055ng/mL Rat Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) ELISA Kit Rattus norvegicus Rat
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