Aureobasidin A (AbA) 金擔子素A/短梗霉素A

——Clontech/Takara 酵母菌/真菌轉化實驗選擇性抗生素/酵母單雜交/雙雜交研究

搜索關鍵詞：選擇性抗生素；酵母菌轉化系統【釀酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌轉化系統【構巢曲霉、黑曲霉】；酵母單雜交/雙雜交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突變基因；

基本描述：

金擔子素A（Aureobasidin A，AbA），也稱為短梗霉素A，一種來源于絲狀真菌Aureobasidium pullulans No. R106的環酯肽類抗真菌抗生素，在較低濃度（0.1-0.5μg/ml）下即可對酵母菌產生毒性，對該抗生素敏感的真菌包括：釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、構巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillus niger.）。金擔子素AbA通過抑制真菌生長所依賴的肌醇磷脂酰神經酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻礙神經酰胺到肌醇磷脂酰神經酰胺的合成，導致鞘脂類物質的合成量不足，細胞膜破裂，進而殺死菌株。研究發現，來自釀酒酵母菌的AUR1和構巢曲霉的AURA基因，兩者具有同源性，都能夠編碼IPC合成酶，對這兩種基因的點突變，也都賦予菌株對AbA產生很強的抗性，比如：突變基因AUR1-C。

AbA用作選擇性標記的應用和優勢：

酵母轉化研究中，金擔子素A（AbA）是一種非常有效的選擇性標志；
使用上基本不需優化條件，且創造極低背景。AbA抗性是酵母雙雜交研究中理想的報告子，兼容于攜帶相應抗性的酵母單雜交/雙雜交系統，并提供良好的篩選結果。

攜帶AbA抗性基因（AUR1-C）的商業化載體：

大腸桿菌-酵母菌穿梭載體/大腸桿菌-曲霉穿梭載體（shuttle vector）

簡單描述：pAUR載體系統包含六種大腸桿菌-酵母菌穿梭載體，每一種特別改造用于釀酒酵母、粟酒裂殖酵母或者構巢曲霉，這些載體都涵蓋一個新型的藥物抗性選擇性標志（金擔子素Aureobasidin A抗性），使得酵母菌或絲狀真菌具有此抗性。

【各載體及其特點詳見Mangkangbio】

酵母報告基因載體（yeast reporter vector）

載體名稱

特點

備注

pAbAi Vector

用于單雜交（one-hybrid）實驗的酵母報告載體，可用來鑒定和分類DNA結合蛋白。特別設計兼容于Matchmaker Gold 酵母單雜交篩選系統，順式作用元件（靶向序列）可插入MCS用作誘餌以篩選GAL4 AD/cDNA融合文庫；目標蛋白-DNA的相互作用驅動AUR1-C抗性基因表達，從而能篩選到AbA抗性酵母；

Matchmaker Gold

酵母單雜交系統

p53-AbAi Vector

酵母報告載體，配合Matchmaker Gold 酵母單雜交篩選系統的陽性對照載體；含p53結合序列（順式作用元件）；AbA抗性基因AUR1-C的表達受GAL4 AD-p53與p53結合序列的相互作用而誘發；p53-AbAi在酵母細胞內不能游離繁殖，僅當整合進入宿主染色體才可以穩定存在，通過載體上的URA3基因和酵母菌株上的非功能ura3-52 locus發生同源重組以實現整合。另，含Col E1復制起始子和AmpR，可實現大腸桿菌內的擴增和復制。

基本特性：

同義名：短梗霉素A
分子式：C₆₀H₉₂N₈O₁₁
分子量：1100 Da
純度：≥95%
熔點：155-157℃

6）溶解性：不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）

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Clontech

630466

Aureobasidin A for Yeast Two-Hybrid Studies

【1mg/ml in methanol 特殊包裝，經濟實惠】

1mg

950

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