質(zhì)譜級蛋白酶

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更新時間：2023-08-08 13:03:42瀏覽次數(shù)：133次

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產(chǎn)品簡介

質(zhì)譜級蛋白酶

詳細介紹

? 出色的選擇性—具有 >95% 的 C 端賴氨酸和特異性；LysC 具有 >90% 的 C 端賴氨酸切割特異性
? 高純度—未檢測到活性（）
? 酶切—/LysC 酶組合可減少缺失切割
? 增強穩(wěn)定性—經(jīng)過化學修飾可降低自溶活性
? 便利—酶以穩(wěn)定的凍干或液體形式提供

是一種源自豬胰腺提取物的質(zhì)譜 (MS) 級蛋白酶，特異性切割賴氨酸和殘基的羧基側(cè)。該酶經(jīng)過 TPCK 處理消除了活性，并通過甲基化進行化學修飾，得到高活性和更穩(wěn)定的酶形式。可耐受常用的部分變性條件，如 0.1 SDS、1 M 尿素和 10% 乙腈。Pierce 在 pH 7-9 范圍內(nèi)活性較佳，在 pH < 4="" 條件下可逆失活。以="" 1="" mg、5="" 包="" 20="" µg="" 或="" 100="" µg="" 的凍干粉和="" 100="" µg="">

Lys-C 蛋白酶是從產(chǎn)酶溶桿菌中分離獲得的質(zhì)譜 (MS) 級蛋白酶。Lys-C 蛋白酶對賴氨酸殘基具有較高的活性和特異性，與（即較少的肽段）相比，肽段較大，樣品的復雜性較低。與不同，Lys-C 蛋白酶可以先切割賴氨酸然后切割，這使其適用于序列蛋白酶切，然后進行酶切，以減少切割缺失。這些的 Lys-C 蛋白酶特性可確保單獨使用或隨后進行酶切時的高酶切效率。此外，Lys-C 原型肽通常具有較高的電荷狀態(tài)，使其成為 ETD 片段化的酶。

Lys-C 通常用于磷酸肽富集工作流程中，因為可在 N 和 C 端生成帶有伯胺的肽，可利用胺反應性同量異位標簽對片段進行雙標記。這導致肽電離增強和定量限提高，因為在 MS3 采集期間可重新分離更多碎片離子。該酶可用于溶液內(nèi)或膠內(nèi)酶切工作流程，以產(chǎn)生用于 LC-MS/MS 蛋白鑒別的肽。

在 37°C 下可在 2 小時內(nèi)完成高效蛋白酶切。在高度變性條件下（如 8 M 尿素、2 M 鹽酸胍、1% SDS、2% CHAPS 和 40% 乙腈），Lys-C 蛋白酶可保持活性，并在 pH 7–9 條件下充分發(fā)揮作用（pH 8 下活性）。該凍干酶的質(zhì)量為 30 kDa，在 –20°C 下儲存時可保持穩(wěn)定 1 年。該 Lys-C 酶以凍干形式（20 µg 或 100 µg含量）包裝。

/Lys-C 蛋白酶混合物是和 LysC 蛋白酶的凍干混合物，已經(jīng)過優(yōu)化以提高蛋白酶切效率。盡管通常用于蛋白酶切，但單獨這一種蛋白酶并不足以酶切賴氨酸和殘基的羧基端的蛋白。因此，Lys-C 蛋白酶通常與共同作用，以連續(xù)酶切蛋白，缺失切割較少。/Lys-C 蛋白酶混合物以 20 µg、5 x 20 µg 或 100 µg 靈活規(guī)格提供。根據(jù)酶與蛋白比值，酶切可在短短 1.5–3 小時內(nèi)完成或者最長過夜完成。

、GluC、Asp-N 蛋白酶

? 增加序列覆蓋范圍—具有互補色譜、電離和片段化特性的重疊肽的蛋白表征結(jié)果較佳
? 高比活性—每種蛋白酶都具有的酶特異性
?穩(wěn)定—以凍干形式提供

Asp-N 蛋白酶是一種 MS 級鋅金屬蛋白酶，來源于莓實假單胞菌的突變菌株，需要痕量鋅來維持活性。Asp-N 蛋白酶主要在半氧化產(chǎn)生的天冬氨酸和半的氨基側(cè)切割。也可能在殘基切割；但是，谷氨酰基殘基的切割率顯著低于天冬氨酸殘基的切割率。在 37°C 條件下，Asp-N 蛋白酶可在 2–20 小時內(nèi)高效酶切蛋白，活性大于 20,000 單位/mg 蛋白，在變性條件（如 1 M 尿素、2 M 鹽酸·胍、0.1% SDS、2% CHAPS 和 10% 乙腈）下仍可保持活性，在 pH 6–8 條件下具有較佳活性。該凍干酶的質(zhì)量為 27 kDa，在 -20°C 下儲存時可保持穩(wěn)定 1 年。

Glu-C 蛋白酶也稱為 V-8 蛋白酶，是從中分離獲得的 MS 級蛋白酶。Glu-C 蛋白酶特異性切割碳酸氫銨和醋酸銨緩沖液中殘基的羧基側(cè)，產(chǎn)生少量的肽片段。在磷酸鹽緩沖液中也可能在和天冬氨酸殘基切割。在 37°C 條件下，Glu-C 蛋白酶可在 5–18 小時內(nèi)高效酶切蛋白，活性大于 500 單位/mg 蛋白，在變性條件（如 2 M 尿素、1 M 鹽酸胍、0.1% SDS、2% CHAPS 和 20% 乙腈）下仍可保持活性。在 pH 8 條件下，Glu-C 蛋白酶活性較佳。該凍干酶的質(zhì)量為 27 kDa，在 -20°C 下儲存時可保持穩(wěn)定 1 年。

是一種從牛胰腺中分離獲得的 MS 級胞內(nèi)蛋白酶，特異性切割、苯、和的羧基側(cè)。在牛胰腺中發(fā)現(xiàn)兩種主要形式的 A 和 B，其含量相等。它們是相似的蛋白質(zhì)（80% 同源性），但具有不同的蛋白水解特征。Thermo Scientific 有兩種形式的。由于可能與天然來源的共純化，Thermo Scientific 經(jīng) TLCK 處理以消除可能的活性，提高酶切特異性。可以耐受溫和的變性條件，如 0.1% SDS、2 M 尿素、2 M 鹽酸·胍、1% CHAPS 和 30% 乙腈，在 pH 7.5–8.5 條件下具有較佳活性。該凍干酶的質(zhì)量為 25 kDa，在 -20°C 下儲存時可保持穩(wěn)定 1 年。

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.