污水處理設(shè)備 污泥處理設(shè)備 水處理過(guò)濾器 軟化水設(shè)備/除鹽設(shè)備 純凈水設(shè)備 消毒設(shè)備|加藥設(shè)備 供水/儲(chǔ)水/集水/排水/輔助 水處理膜 過(guò)濾器濾芯 水處理濾料 水處理劑 水處理填料 其它水處理設(shè)備
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閱讀:1957發(fā)布時(shí)間:2016-11-10
實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞收集的具體方法步驟,實(shí)驗(yàn)室收集細(xì)胞,對(duì)于細(xì)胞的研究極為重要,如何收集細(xì)胞成為實(shí)驗(yàn)室的必做項(xiàng)目之一,那么下面金益柏的博士就帶大家一起來(lái)了解下以下三種方法:
WB收集細(xì)胞:
將細(xì)胞培養(yǎng)基棄掉,用PBS清洗兩次,使用*消化細(xì)胞或細(xì)胞刮,將細(xì)胞懸濁液離心1000rpm/5min,棄上清,保留底層細(xì)胞。如要裂解細(xì)胞6孔板(99ulRIPA+1ulPMSF),細(xì)胞培養(yǎng)皿(198ulRIPA+2ulPMSF),若要做磷酸化蛋白則加如1ul抑制磷酸化蛋白降解抑制劑,加入細(xì)胞裂解液后用移液器將細(xì)胞吹勻,冰上靜置5min,離心4℃ 12500g/5min,吸取上清液,置于-80℃冰箱;若不裂解細(xì)胞,將細(xì)胞置于-80℃冰箱。
elisa試劑盒
普通PCR收集細(xì)胞:
將細(xì)胞培養(yǎng)基棄掉,用PBS清洗兩次,使用*消化細(xì)胞或細(xì)胞刮,將細(xì)胞懸濁液離心1000rpm/5min,棄上清,保留底層細(xì)胞。將細(xì)胞置于-20℃冰箱。
qRT-PCR收集細(xì)胞:
將細(xì)胞培養(yǎng)基棄掉,用PBS清洗兩次,使用*消化細(xì)胞或細(xì)胞刮,將細(xì)胞懸濁液離心1000rpm/5min,棄上清,保留底層細(xì)胞。加入1ml TRIZOL,置于-80℃冰箱。(注意:本實(shí)驗(yàn)需使用耗材和試劑都為無(wú)RNA酶,PBS必須高壓,離心管和槍頭必須無(wú)酶
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