LNCAP FGC人前列腺癌細胞（STR鑒定）人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性（血型B+）的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離，該患者經確診為前列腺癌轉移。這株細胞對5-α-二氫睪酮（生長調節子和酸性磷酸脂酶產物）有響應。這株細胞并不形成*的單層，而是形成集落，在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養基變酸。生長很慢，傳代后48小時內不應

詳細介紹

LNCAP FGC人前列腺癌細胞（STR鑒定）
英文名稱：
規格：1*10 ⁶
細胞介紹
人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結針刺活檢中分離，該患者經確診為前列腺癌轉移。這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。這株細胞并不形成*的單層，而是形成集落，在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上，不形成匯合，很快使培養基變酸。生長很慢，傳代后48小時內不應擾動。當培養瓶封包后，多數細胞從培養瓶底分離，懸浮在培養基中。收到后，在通常培養單層細胞的條件下培養24到48小時，以使細胞再貼壁。此后可以換上新鮮培養液。如果需要，培養瓶內容物可以收集，300g離心15分鐘，以10毫升培養液重懸并培養到一個單獨的培養瓶中。請使用Corning的Cellbind培養瓶培養。
一、細胞特性
1）來源：前列腺；左鎖骨淋巴結癌轉移灶
2）形態：上皮細胞樣
3）含量：>1x106 個/mL
4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
二、細胞收到后處理
LNCAP FGC人前列腺癌細胞（STR鑒定）在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿*培養液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的*培養液移入廢液缸中，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養液，懸浮細胞需離心處理，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。
三、細胞培養步驟
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中，加入約6ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
2、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集，1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，進行離心收集，1000RPM條件下離心5分鐘，去除上清，按凍存數量加入血清及DMSO，凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
出現問題，可重發的情況有哪些？判定標準是什么？
（1）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發；