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柱式動物線粒體DNAout,測序級線粒體是非常重要的細胞器,它不但跟很多人類疾病相關,而且還是母系遺傳
研究的重要材料。對線粒體進行遺傳研究和進化研究都需要純化線粒體DNA。本產品
就是基于先純化動物細胞線粒體、再從中柱式法純化其DNA的兩步法試劑盒。它具有
下列特點:
1. 即開即用,用戶不需要自己配制各種溶液,優化各種條件。
柱式動物線粒體DNAout,測序級
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
柱式動物線粒體DNAout,測序級 | 15次 | 1990元 |
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線粒體是非常重要的細胞器,它不但跟很多人類疾病相關,而且還是母系遺傳
研究的重要材料。對線粒體進行遺傳研究和進化研究都需要純化線粒體DNA。本產品
就是基于先純化動物細胞線粒體、再從中柱式法純化其DNA的兩步法試劑盒。它具有
下列特點:
1. 即開即用,用戶不需要自己配制各種溶液,優化各種條件。
2. 兩步法,先純化線粒體,再柱式法純化其中的DNA,有粗提(mtDNA純化前不用DNase處理線粒體)和精提(mtDNA純化前用DNase處理線粒體)兩套操作方案,適合于各種要求不同的后續實驗。
3. 本產品一,測序級次可以處理約107×108個培養細胞,10 mg培養細胞(相當于5瓶150 mm培養細胞)可以純化到到0.2-0.5 mg線粒體。
4. 本產品適用于各種懸浮培養和貼壁培養動物細胞,不建議用于動物實體組織。
5. 提供線粒體染液,可以在操作中隨時監測純化過程中線粒體的完整性。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,,測序級離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
,測序級相關產品列表:
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