環狀DNA全基因組擴增試劑盒

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更新時間：2018-06-13 15:02:43瀏覽次數：253次

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產品簡介

環狀DNA全基因組擴增試劑盒環狀DNA包括質粒DNA、線粒體DNA、葉綠體DNA和某些病毒DNA，但這些DNA樣品中往往含有宿主或細胞核的基因組DNA，如果直接進行WGA擴增，則會得到基因組DNA和上述環狀DNA的混合物。為了特異性地擴增環狀DNA，本公司開發了本產品，它有如下優點：
1．即開即用，不需要單獨準備所需試劑和對反應條件進行優化。

詳細介紹

環狀DNA全基因組擴增試劑盒

名稱	規格	價格	手冊
環狀DNA全基因組擴增試劑盒	30次	詢價

環狀DNA包括質粒DNA、線粒體DNA、葉綠體DNA和某些病毒DNA，但這些DNA樣品中往往含有宿主或細胞核的基因組DNA，如果直接進行WGA擴增，則會得到基因組DNA和上述環狀DNA的混合物。為了特異性地擴增環狀DNA，本公司開發了本產品，它有如下優點：

1．即開即用，不需要單獨準備所需試劑和對反應條件進行優化。

2．整合了本公司的線狀DNA清除劑，減少了其對環狀DNA擴增的污染。

3．可以用于質粒DNA、線粒體DNA、葉綠體DNA、環狀病毒DNA和任何環狀DNA的WGA。

4．得到的產物可用于多種后續試驗，包括多重PCR、長片斷PCR、定量PCR、克隆、文庫構建、測序、基因芯片分析、各種遺傳分析等。

5．如果是質粒，得到得WGA產物可以直接轉化酵母，也可以酶切后自連，再轉化細菌，能提高轉化效率上千倍。

RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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