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上海通蔚生物有限公司
TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色)為客戶供應*貼心的服務,與每一位顧客建立良好的合作關系,通過不定期進行回訪,經過不斷的實驗優化和改進,積累大量的經驗,力求做到更好!
TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色)產品簡介:
3,3',5,5'-四甲基(TMB)是非常*的酶免試驗顯色劑,能溶解于多種有機溶劑和雙蒸水中,為穩定的無色溶液,與適量或與緩沖液混勻后,與過氧化物酶作用產生清晰的藍色產物,極易觀察。由于其靈敏度高,配制后的工作液穩定,加上無致癌特性,被廣泛用于酶聯免疫(ELISA)試驗和尿試紙的檢測反應等。TMB主要應用于酶聯免疫吸附實驗(ELISA),經典的方法是采用A、B液分開配制,使用前再混合的方法,并且*存放穩定。本試劑一般情況下為無色,有時略顯淺藍色或淺黃色。
TMB顯色液特點是:靈敏度高,穩定性好,顯色終止后讀數穩定。背景低:底物溶液在650nm檢測時檢測OD值小于0.04。
操作步驟(僅供參考):
1、用適當的干凈容器(用純凈水反復沖洗),取試劑(A)、(B)、(C),按A:B:C= 5000:5000:4混合,待達到室溫后即可使用。
2、加液:加完HRP結合物并溫育一定時間后,洗板3~5次,每孔加TMB顯色液100ul。 根據個人實驗需要,在室溫(15~25℃)或37℃下溫育10~30分鐘。
3、終止:加等體積的1M鹽酸或硫酸溶液終止反應,孔中反應液由藍色變為黃色。
4、讀數:終止反應后30min內在450nm處讀數。
TMB底物顯色試劑盒(ELISA,HRP顯色) 注意事項:
如果出現高的反應背景或沉淀,表明TMB底物反應過于強烈。
為了避免產生沉淀,可在終止后馬上讀數,或者進一步稀釋一抗和/或HRP結合物,再次進行試驗。
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