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葉綠素熒光儀的熒光參數在葉綠素熒光分析中Z常用的基本熒光參數是初始熒光Fo、暗適應后Z大熒光產量Fm、可變熒光Fv、Z大光化學效率Fv/Fm、光照下Z大熒光產量Fm“、給定光強下穩態熒光Fs、光照下光系統II的有效量子產量Yield、光化學猝滅系數qP、非光化學猝滅系數qP和NPQ。
葉綠素熒光儀光合作用機理
光合作用的是能量及物質的轉化過程,首先由葉綠素將光能轉化成電能,經電子傳遞產生ATP和NADPH形式的不穩定化學能,zui終轉化成穩定的化學能儲存在糖類化合物中。
光反應:吸收光能,合成一些如ATP、NADPH等高能物質,用以維持細胞生長;
暗反應:利用ATP、NADPH固定二氧化碳,生成一些列碳水化合物 葉綠素熒光動力學包含著光合作用過程的重要信息,如光能的吸收和轉化。能量的傳遞與分配、反應中心的狀態,過剩能量的耗散以及反映光合作用的光抑制和光破壞。應用葉綠素熒光可以對植物材料進行原位、無損傷的檢測,且操作步驟簡單。所以葉綠素熒光越來越受到人們的青睞,在光合生理和逆境生理等研究領域有著廣泛的應用。
構成
電源
光源:測量光源、光化光源、飽和光源
信號探測器 濾波器(熒光波段通過)
其他傳感器
應用領域
植物生理學,物生態學,植物病理學,農學,林學,園藝學,遺傳育種,突變株篩選,環境科學,毒理學,水生物學。
葉綠素熒光儀的組成
調制葉綠素熒光儀離不開光調制技術,有了它才能使得我們在有環境光的情況下測量葉綠素熒光;其次就是飽和脈沖技術。所謂飽和脈沖技術,就是提供一個瞬間的強光脈沖,來暫時打斷光系統II電子傳遞過程。光合機構吸收的光能有三條去激途徑:光化學反應p、葉綠素熒光f和熱耗散d。根據能量守恒原理,假設吸收的光能為常數1,得到1=P+F+D。葉綠素熒光產量可以測量出來,而我們希望得出P和D兩個參數。根據基本的數學原理,一個等式有兩個未知數是無解的。此時如果給出一個飽和脈沖,暫時打斷光化學反應過程,則P=0這個等式就可以求解了。由此可知,飽和脈沖技術的基本作用就是打斷光合作用,用于求出光化學反應和熱耗散分別用去了多少能量。理想的熒光儀必須能在不改變樣品狀態的情況下即非破壞性進行生理活性測量,需要滿足如下幾條要求:
1、測量光必須足夠低,只激發色素的本底熒光而不引起光合作用,這樣才能獲得暗適應后的zui小熒光Fo
2、測量光由一系列微秒級的光脈沖組成,這些短光脈沖可以不同的頻率給出。在很低的頻率下,即使單個微秒級光脈沖的強度比較高,也不會引起光合作用;
3、用反應迅速、線性范圍大的光電二極管或光電倍增管來檢測這些由微秒級測量光脈沖激 發的微秒級熒光脈沖;熒光脈沖信號首先由交流耦合放大器放大,然后進一步經選擇性鎖相放大器處理,只放大和調制測量光同頻率的熒光信號,可以有效屏蔽環境中本身就存在的與葉綠素熒光同波長的背景噪音。
4、當打開光化光或飽和脈沖時,可以自動提高測量光頻率,以提高信號采點率,有效記錄一些比較快速的熒光動力學變化。
葉綠素熒光儀的熒光參數
在葉綠素熒光分析中zui常用的基本熒光參數是初始熒光Fo、暗適應后zui大熒光產量Fm、可變熒光Fv、zui大光化學效率Fv/Fm、光照下zui大熒光產量Fm"、給定光強下穩態熒光Fs、光照下光系統II的有效量子產量Yield、光化學猝滅系數qP、非光化學猝滅系數qP和NPQ。在這里Fo是已經暗適應的光和機構光系統II反應中心均處于開放時的熒光強度,它與所激發的強度和葉綠素濃度有關,而與光合作用的光反應無關。Fm為充分暗適應后的zui大熒光,是已經暗適應的光合機構光系統II反應中心全部關閉時的熒光強度,Fv是熒光的可變部分,受耗散能量的途徑因素的影響。Fv/Fm是表明光化學反應狀況的一個重要參數,反應光系統II反應中心的zui大光能轉換效應。
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