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支原體污染:組織培養應用中的關鍵問題

閱讀:263發布時間:2011-10-14

支原體污染:組織培養應用中的關鍵問題

何謂支原體?

作為一種非常之小的細菌,支原體的特點是沒有精密的細胞壁。此細胞壁缺失,導致有機體具有可塑性,使得支原體形狀具有高度的多變性,從球狀到分支長絲狀均有呈現,且大小直徑從0.15到0.3µm之間不等。由于其可塑性,支原體可以通過0.2µm級(細菌截留)過濾器,此外,由于其細胞壁缺失,支原體能夠耐受某些阻礙細菌細胞壁合成的抗生素(譬如*)。

 

支原體為何應當受到我們的重視?

支原體是細胞培養中的常見污染物。由于其尺寸非常之小,且生長速度較慢,利用常規實驗室方法難以辨認污染物。然而,對于任何受其感染的細胞培養,支原體都具有隱伏性的影響。譬如,包含一百萬個哺乳動物細胞的培養基,可被多達5億個支原體感染(Stanbridge,1981)。存在如此巨大數量的污染物,將會強烈地影響被感染宿主細胞的結構和功能,譬如:

 

  •            改變細胞生長速率
  •            抑制或刺激細胞轉化
  •            潛在有害的形態變異
  •            改變DNA、RNA以及蛋白質合成
  •            改變酶作用
  •            染色體異常
  •            減少或增加病毒產量
  •            耗盡生長培養基中的營養成分
  •            改變細胞表面抗原特性
  •            降低腫瘤細胞的惡性

 

參考文獻: Stanbridge, Eric J. “支原體檢測-獲得科學準確性的必要手段' Israel J Med Sci 17: 563-568 (1981).

 

鑒于支原體污染對于培養細胞的不利影響,顯而易見,對于任何源自受到支原體感染的細胞培養相關數據,其準確性均有待置疑,并應懷著謹慎和懷疑的態度處理這些數據(Stanbridge,1981)。

 

選用何種孔徑的濾膜,方能有效去除支原體?

利用0.1µm級過濾器,能夠截留支原體。Pall Life Sciences出品的0.1µm級Supor®濾膜,配備親水性本質的聚醚砜濾膜,以去除支原體。Pall公司多種實驗室過濾器產品中均整合了此濾膜,以作為組織和細胞培養應用的理想之選。

利用Pall公司0.1µm級濾膜,可以zui大程度地保障支原體不會藉由血清(或含有血清的介質)導入培養基。


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