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特點:
. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。?
產品名稱 | 轉基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒 |
規格 | 48T/盒 |
分類 | 熒光-PCR法 |
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用途:
. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產品A 型含電泳染料,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經過精心優化,反應的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產品5 μL 與用戶自備的模板,引物和水共5 μL 混合后,直接進行PCR反(PCR 參數由用戶自己確定),反應結束后直接取0 μL 電泳檢查擴增結果。
使用及效果:
PCR反應特點
() 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=0-2g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=0-6g)水平。能從00萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
常見問題:點擊了解更多熒光-PCR法。
一.沒有擴增產物
.循環溫度:變性溫度、退火溫度
2.引物設計
3.DNA聚合酶活性
4.抑制性成份(蛋白酶、核酸酶、其它抑制聚合 酶活性的成份)
5、DNA樣品
二.非特異產物及電泳呈涂布狀
.Mg2 濃度
2.調整引物、模板、聚合酶的用量
3.適當減少循環數
4.適當提高退火溫度,縮短退火或延伸時間
?L-2-氨基己 250mL TE Buffer,20X,pH7.6 常溫保存
2-氨基-5-基三氟甲苯 250mL TE Buffer,20X,pH8.0 常溫保存
5-溴-2-氯嘧啶 00mL TE Buffer,50X,pH7.4 常溫保存
2-羥基-6-基啶 00mL TE Buffer,50X,pH7.6 常溫保存
4-氯乙酰乙酯 00mL TE Buffer,50X,pH8.0 常溫保存
三基乙酰 250mL TE Buffer,pH7.4 常溫保存
D-2-氨基-4-基戊 250mL TE Buffer,pH7.6 常溫保存
DL-白氨 250mL TE Buffer,pH8.0 常溫保存
4-三氟基乙 00mL TEA Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
2-(三氟甲氧基) 00mL TEA Buffer,0.2M,pH7.4 常溫保存
丙二叔丁基乙酯 00mL TEA Buffer,0.2M,pH8.0 常溫保存
3-溴-5-三氟基甲 00mL TEA Buffer,0.2M,pH8.5 常溫保存
3,5-雙三氟基溴苯 00mL TE-LiAc Solution,X 常溫保存
3,4-二氯三氟甲苯 00mL TES Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
4-三氟基甲酰 00mL TES Buffer,0.2M,pH7.4 常溫保存
轉基因植物PAT基因核酸檢測試劑盒SDPR(serum deprivation response) 人血清剝奪反應相關蛋白 CAS: 規格: 25mg
HNP-3(neutrophil peptide -3) 人中性粒細胞防御素-3 CAS: 89797-00-2 規格: 50mg
ECP(eosinophil cationic protein) 人嗜性粒細胞陽離子蛋白 CAS: 255376-57-9 規格: 25mg
PS(plasma anticoagulant protein S) 人血漿抗凝蛋白S CAS: 47-58-0 規格: 00mg
PC(plasma anticoagulant protein C) 人血漿抗凝蛋白C CAS: 83-73-8 規格: 00mg
Fc Gamma(Fc region of immunoglobulin G) G Fc片段 CAS: 6608-95-0 規格: 200mg
CyPB(cyclophilin B) 人嗜環蛋白/親環素B CAS: 327-80-7 規格: 00mg
C4BP(C4 binding protein) 人C4結合蛋白 CAS: 7680-93-9 規格: 50mg
C3c(Complement fragment 3c) 人補體片段3c CAS: 76820-34-3 規格: 00mg
C7(Complement fragment 3c0 人補體7 CAS: 6066-93-0 規格: 200mg
A Beta-42(amyloid beta peptide -42) 人β淀粉樣蛋白-42 CAS: 6066-98-5 規格: 50mg
chemerin 人chemerin CAS: 規格: 00mg
F XII (coagulation factor XII ) 人Ⅻ CAS: 規格: 40mg
F X III (coagulation factor X III ) 人ⅩⅢ CAS: 73334-07-3 規格: 400mg
F III (coagulation factor III 0 人Ⅲ CAS: 5436-5-0 規格: 50mg
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