探針設(shè)計(jì)合成-2OD(一端標(biāo)記、FAM)
服務(wù)介紹:
根據(jù)提供的基因序列,采用寡核苷酸設(shè)計(jì)軟件,設(shè)計(jì)出候補(bǔ)探針序列,經(jīng)數(shù)據(jù)庫比對后,判斷特異性合格后,按序列合成出對應(yīng)的核酸序列并標(biāo)記特定的標(biāo)記物.
名稱 | 規(guī)格 |
探針設(shè)計(jì)合成-2OD(一端標(biāo)記、FAM) | 條/2OD |
實(shí)驗(yàn)流程:
1.1設(shè)計(jì)
設(shè)計(jì)具有特異性的探針序列
1.2 合成
采用固相亞磷酰胺三酯法,經(jīng)過四步循環(huán)反應(yīng):脫保護(hù)、耦連、加帽、氧化,逐一將一個(gè)一個(gè)核苷酸單體連接在3’固相載體上,在過程中將修飾標(biāo)記在相應(yīng)位置。
1.3 氨解
將合成好的寡聚核苷酸從固體載體(CPG)上化學(xué)切割下來,經(jīng)氨解脫去保護(hù)基團(tuán)。
1.4純化
粗品質(zhì)檢合格后,對粗品進(jìn)行HPLC純化,通過分離度不同分離雜質(zhì),制備出目標(biāo)產(chǎn)物純品。
1.5質(zhì)檢
利用LTQ-MS質(zhì)譜儀對目標(biāo)產(chǎn)物純品進(jìn)行檢測。
1.6 定量分裝
利用酶標(biāo)儀對合格純品進(jìn)行A260定量分裝,然后用真空干燥機(jī)抽干樣品至呈干粉狀。
送樣運(yùn)輸要求:
干粉狀態(tài)4度運(yùn)輸。液體狀態(tài)-20度運(yùn)輸