關于客戶在收到細胞后正確的處理方法
羊水間充質干細胞細胞,HuFACs-11細胞
有經驗和剛剛從事細胞培養工作的人員都應該認真仔細地詢問下細胞提供方提供的建議,提前了解所要培養細胞的詳細資料,準備好細胞所要用到的培養基和相關試劑,雖然所有的貼壁,半貼壁或者懸浮細胞處理方式差不多,但是不同的實驗室培養條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在,也會導致對細胞處理不當,或者環境的不適應而造成細胞的死亡。
羊水間充質干細胞細胞,HuFACs-11細胞
1.收到細胞,*時間要鏡檢:觀察細胞形態是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術人員。由于運輸的時間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養基的瓶子里生長的狀態和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養基瓶子里面,會發生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以*的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。
2.當通過上一步的觀察,細胞初步沒有任何問題時,進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養基,僅保留5到10mL培養所需的常規培養基;或更換新鮮的培養基,置于培養箱中,隨后每天觀察。細胞在低于正常生長溫度情況下,會調整為靜止期,或者慢速生*,必須恢復37度的環境至少3個小時左右,才能重新調整到接近對數生*的狀態,在對數生*進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。
3.如果經*步觀察發現細胞密度超過90%,并且細胞狀態很好時,則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態穩定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態容易波動的細胞類型,一次少傳些,保證每瓶細胞密度大些,便于穩定生長。至于一些比較陌生的細胞,*次處理也可以依照第二種情況。
收到細胞后,在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態:
如果沒長滿,將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培
養液,繼續培養。
如果細胞已經長滿(約80%-90%)則傳代后繼續培養。
傳代方法:
1 棄去培養基,用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的*(含0.02%EDTA),讓*與大部分細胞接觸后
放入37℃培養箱內,隨時觀察細胞狀態變化,待細胞大部分變圓后加
*培養基終止消化。
3 一般沒有特殊說明,細胞一般是一傳二。
凍存方法:
70% *培養基,20%FBS,10%DMSO,現用現配。
儲存:液氮中*保存。
注1 觀察細胞在低倍鏡下觀察,便于整體估計細胞密度。
2 在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落,可離
心吹打后重新種入瓶中培養。
3 收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等,請及時與我們。
,還可供應細胞如下:
ES-2 | ES-2(卵巢癌) |
CaoV3 | CaoV3(卵巢癌) |
Ovcar | Ovcar(卵巢癌) |
OMC | OMC(卵巢癌) |
Siha | Siha(宮頸癌) |
JEG-3 | JEG-3(滋養細胞腫瘤) |
JAR | JAR(滋養細胞腫瘤) |
BeWo | BeWo(滋養細胞腫瘤) |
CHO | 中國倉鼠卵巢細胞 |
iPS | iPS細胞系 |
ESC | 子宮內膜間質細胞系ESC |
ESC | 子宮內膜上皮細胞系ESC |
| 胚胎干細胞系-男性 |
RTE | 大鼠支氣管粘膜細胞系RTE |
Human HCT-116 | 人結腸癌細胞 |
Human HCT-8 | 人結腸癌細胞 |
Human Lovo | 人LOVO結腸癌細胞 |
Human sw480 | 人結腸癌細胞 |
Human sw620 | 人結腸癌細胞 |
Human SMMC-7721 | 人肝癌細胞 |
Human SMMC-7721 | 人肝癌細胞 |
Human QGY-7701 | 人肝癌細胞 |
Human QGY-7703 | 人肝癌細胞 |
Human bel7402 | 人肝癌細胞系 |
Human Hep G2 | 人肝癌細胞 |
Human SK-HEP-1 | 人肝癌細胞 |
Human MGC-803 | 人胃癌細胞系 |
Human HGC-27 | 人胃癌細胞(未分化) |
Human BGC-823 | 人胃腺癌細胞(低分化) |
Human AGS | 人胃腺癌細胞 |
Human Bcap-37 | 人乳腺癌細胞 |
Human MCF7 | 人乳腺癌細胞 |
Human MDA-MB-231 | 人乳腺癌細胞 |
Human MDA-MB-435S | 人乳腺導管癌細胞 |
Human SK-BR-3 | 人乳腺癌細胞 |
Human MCF7-Her218 | 乳腺癌 |
4T1 | 小鼠乳癌細胞 |
Human 2508wnt | 小鼠皮膚黑色素瘤 |
Human 2855wnt | 小鼠皮膚黑色素瘤 |
Human H1299 | 人肺腺癌細胞 |
Human A549 | 人肺癌細胞 |
Human 95-D | 人高轉移肺癌細胞 |
Human PC-3 | 人前列腺癌細胞 |
Human Dul45 | 人前列腺癌細胞 |
Human WRO | Human WRO |
Human ARO | Human ARO |
Human Hth | Human Hth |
HumanTPC | HumanTPC |
Human HL-60 | 人原髓細胞白血病細胞 |
Human THP-1 | 人單核細胞白血病 |
Human U-937 | 人組織細胞淋巴瘤細胞 |
Human Raji | 人Burkitt’s淋巴瘤細胞 |
Human HuT 78 | 人T淋巴細胞白血病細胞 |
Human K-562 | 人慢性髓原白血病細胞 |
Human Hela | 人子宮頸癌細胞 |
Human Hela | 人子宮頸癌細胞 |
Human B16 | 小鼠黑色素瘤細胞 |
Human U2OS | 人骨肉瘤細胞 |
Human Saos 2 | 人成骨肉瘤細胞 |
Human panc1 | 人胰腺癌細胞 |
Human panc28 | 人胰腺癌細胞 |
Human BxPC-3 | 人原位胰腺腺癌細胞 |
Human Aspc-1 | 人轉移胰腺腺癌細胞 |
KMBC | KMBC |
human L02 | 人正常肝細胞 |
human QSG-7701 | 人正常肝細胞 |
human MRC-5 | 人胚肺細胞 |
human WI-38 | 人胚肺細胞 |
human PNT1A | human PNT1A |
mouse ATDC5 | mouse ATDC5 |
human 293T | 人胚腎細胞 |
monkey COS-7 | 非洲綠猴sv40轉化的腎細胞 |
monkey cos-1 | 非洲綠猴SV40轉化的腎細胞 |
monkey cv-1 | 非洲綠猴腎細胞 |
mink Mv.l.lu | mink Mv.l.lu |
mouse NIH 3T3 | 小鼠成纖維細胞 |
mouse MC3T3-E1 | 小鼠胚成骨細胞 |
mouse C2C12 | 小鼠成肌細胞 |
human HMEC-1 | 人類微血管內皮細胞株 |
human HUVEC | 人臍靜脈血管內皮細胞 |
mouse RAW 264.7 | 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 |
mouse N3 | mouse N3 |
mouse N6 | mouse N6 |
hamster CHO | 中國倉鼠卵巢細胞 |
human HA | 人羊膜細胞 |
human MCF10A | 人正常乳腺上皮細胞 |
mouse HC11 | mouse HC11 |
hFOB1.1 | 人SV40 轉染成骨細胞 |
HBL100 | 人乳腺細胞 |
BT549 | 人乳腺細胞 |
HT29 | 人結腸癌細胞 |
CaCo2 | 人結腸腺癌細胞 |
HGC27 | 人胃癌細胞(未分化) |