關于客戶在收到細胞后正確的處理方法
小鼠畸胎瘤細胞，P19細胞
有經驗和剛剛從事細胞培養(yǎng)工作的人員都應該認真仔細地詢問下細胞提供方提供的建議，提前了解所要培養(yǎng)細胞的詳細資料，準備好細胞所要用到的培養(yǎng)基和相關試劑，雖然所有的貼壁，半貼壁或者懸浮細胞處理方式差不多，但是不同的實驗室培養(yǎng)條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在，也會導致對細胞處理不當，或者環(huán)境的不適應而造成細胞的死亡。
小鼠畸胎瘤細胞，P19細胞
1.收到細胞，*時間要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。由于運輸的時間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以*的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。
2.當通過上一步的觀察，細胞初步沒有任何問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。細胞在低于正常生長溫度情況下，會調整為靜止期，或者慢速生*，必須恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調整到接近對數生*的狀態(tài)，在對數生*進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。
3.如果經*步觀察發(fā)現細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，保證每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，*次處理也可以依照第二種情況。
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：
如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培
養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
傳代方法：
1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的*（含0.02%EDTA），讓*與大部分細胞接觸后
放入37℃培養(yǎng)箱內，隨時觀察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變圓后加
*培養(yǎng)基終止消化。
3 一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。
凍存方法：
70% *培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，現用現配。
儲存：液氮中*保存。
注1 觀察細胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度。
2 在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落，可離
心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。
3 收到細胞后若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等，請及時與我們。
，還可供應細胞如下：
| MDA-MB-435S | 人乳腺癌高轉移細胞 |
| LO2 | 人結腸癌細胞 |
| Jukat | 人T淋巴細胞系 |
| MCF-7 | 人乳腺癌細胞 |
| SNU-398 | 人肝癌細胞 |
| SNU-449 | 人肝癌細胞 |
| SNU-182 | 人肝癌細胞 |
| SNU-475 | 人肝癌細胞 |
| SNU-387 | 人肝癌細胞 |
| SNU-423 | 人肝細胞癌 |
| Hep 3B2.1-7 | 人肝癌細胞 |
| NCI-H1755 | 人肺癌細胞 |
| C3A | 永生化肝細胞 |
| HEP G2/2.2.1 | 人肝癌細胞 |
| PLC/PRF/5 | 人肝癌亞力山大細胞 |
| Hepa1-6 | 小鼠肝癌細胞 |
| H4-II-E-C3 | 大鼠肝癌細胞 |
| HuH-7 | 人肝癌細胞 |
| HuH-6 | 人肝母細胞瘤細胞 |
| JTC-27 | 大鼠肝癌細胞 |
| HuH-28 | 人肝癌細胞 |
| THLE-2 | 人肝永生化細胞 |
| THLE-3 | 人肝永生化細胞 |
| Tera-1 | Tera-1 |
| Tera-2 | Tera-2 |
| HUVEC | 人臍靜脈血管內皮細胞 |
| NIH/3T3 | 小鼠胚胎細胞 |
| 293 [HEK-293] | 人胚腎細胞 |
| CHO | 中國倉鼠卵巢細胞 |
| Sp2/0-Ag14 | 小鼠骨髓瘤細胞 |
| K-562 | 人慢性髓原白血病細胞 |
| E.G7-OVA | E.G7-OVA |
| EL4 | 小鼠淋巴瘤細胞 |
| B16-F10 | 小鼠黑色素瘤細胞 |
| A-375 | 人黑色素瘤細胞 |
| NCI-H460 | 人肺癌細胞 |
| NCI-H1299 | 人非小細胞肺癌細胞 |
| NCI-H358 | 人非小細胞肺癌細胞 |
| LL/2 | 小鼠肺癌細胞 |
| 4T1 | 小鼠乳腺癌細胞 |
| MDA-MB-231 | 人乳腺癌細胞 |
| MCF7 | 人乳腺癌細胞 |
| MDA-MB-468 | 人乳腺癌細胞 |
| MDA-MB-435S | 人乳腺癌高轉移細胞 |
| MDA-MB-453 | 人乳腺癌細胞 |
| SK-BR-3 | 人乳腺癌細胞 |
| CT-26 | 小鼠結腸癌細胞 |
| HCT 116 | 人結腸癌細胞 |
| HCT-8 | 人結腸癌細胞 |
| HCT116 | 人結直腸腺癌細胞 |
| LS 174T | 人結腸腺癌細胞 |
| COLO 205 | 人結腸癌細胞 |
| SCC-4 | 人類鱗狀上皮舌癌細胞 |
| SCC-9 | 人類鱗狀上皮舌癌細胞 |
| CAL 27 | 人舌鱗癌細胞 |
| FaDu | 人咽鱗癌細胞 |
| Detroit 562 | Detroit 562 |
| A253 | A253 |
| RPMI 2650 | 人鼻腔上皮細胞 |
| A-431 | 人表皮癌細胞 |
| SK-OV-3 | 人卵巢癌細胞 |
| U-87 MG | 人惡性膠質母細胞瘤細胞 |
| Y79 | 人視網膜母細胞瘤 |
| BxPC-3 | 人原位胰腺腺癌細胞 |
| HPAC | 人胰腺癌細胞 |
| T24 | 人膀胱移行細胞癌細胞 |
| A-498 | 人腎癌細胞 |
| AML12 | 小鼠肝細胞 |
| Hep G2 | 人肝癌細胞 |
| Raji | 血液病及淋巴瘤 |
| U937 | 血液病及淋巴瘤 |
| Daudi | 血液病及淋巴瘤 |
| HL-60 | 血液病及淋巴瘤 |
| Jurkat, Clone E6-1 | 血液病及淋巴瘤 |
| SHG-44 | 神經膠質瘤 |
| U251 | 神經膠質瘤 |
| Du145 | 前列腺癌 |
| 22RV1 | 前列腺癌 |
| PC-3 | 前列腺癌 |
| LNCaP | 前列腺癌 |
| JAR | 胎盤絨毛癌 |
| HEC-1-A | 子宮內膜癌 |
| Ishikawa | 子宮內膜癌 |
| TCHu198 | 子宮內膜癌 |
| SK-OV-3 | 卵巢癌 |
| HO8910 | 卵巢癌 |
| HO8910PM | 卵巢癌 |
| HuFACs-11 | 羊水間充質干細胞 |
| HuAECs-11 | 羊膜上皮細胞 |
| PANC-02 | 胰腺癌細胞 |
| mNSCs-11 | 神經干細胞 |
| rNSCs-12 | 神經干細胞 |
| mMMSC-11 | 骨髓間充質干細胞 |
| mESCs-11 | 胚胎干細胞 |
| TM3 | 小鼠睪丸間質細胞 |
| P19 | 小鼠畸胎瘤細胞 |
| A549 | 人肺癌細胞 |
| m-iPS-11 | iPS |
| Hu-iPS-12 | iPS |
| HuUMSCs-11 | 臍帶間充質干細胞 |
| ECV304 | 血管內皮細胞 |
| HuUVECs-11 | 臍靜脈內皮細胞 |
| 3T3-L1 | 前脂肪胚胎成纖維細胞 |
| MEF-11 | 胚胎成纖維細胞 |
| HuSk-FBCs-11 | 皮膚成纖維細胞 |
| mSk-FBCs-12 | 皮膚成纖維細胞 |
| Vero | 非洲綠猴腎細胞 |
| CHO | 卵巢細胞 |
| HEK-293 | 胚腎細胞 |
