PC-12細胞
PC-12細胞供應PC-12細胞【高活性】現貨供應
細胞相關知識
哺乳細胞的大規模培養方式有三種:貼壁培養、微載體培養、無血清懸浮培養。這三種方式均可用于細胞的大規模培養。細胞在無Ca2+或 含Ca2+培養基中可同樣生長,也可生長在血清濃度降低的培養基中,單層培養細胞在5-10%FBS-DMEM中能生長很好。一般來講,1:10傳代后 ,一周可以長滿。嚴禁過度生長,這點很重要。因為會導致細胞密度加大和堆積,影響病毒斑的形成和轉染,傳代時也不易打散。懸浮的 細胞很容易大規模培養,但不容易保持穩定。細胞在傳代120次以后,其表型可能改變,生長狀況不再*是單層的了,偶爾會形成局 部的細胞成團聚集,應立即拋棄,重新引入新傳代的細胞。
1、用大瓶培養較小瓶要好,可能是更有利于293均勻的分布,利于營養的攝取
2、培養液要新鮮,每次只配1000ml,分為2-4瓶,不用的培養液,凍存在-20度
3、要及時傳代,是細胞基本鋪滿培養瓶底部,但是細胞之間還沒有*貼緊,總是多少有空隙的時候。
4、如果細胞貼壁不好,可能是消化過久,或是培養瓶不夠干凈,當然要除外細胞污染。
5、如果使用用玻璃培養瓶或皿,可以采用高壓滅菌的0.2%明膠溶液預處理培養/培養皿,方法是將明膠加入培養皿,使之浸泡到底面的各 個部分,然后吸出,置超凈臺內晾干即可使用。這樣處理后細胞貼壁效果好且鏡下細胞立體感強。如果是新的塑料培養瓶就不用處理。
物種來源:
1.種屬:人(Human)
2.器官:胚腎(embryonic kidney)
3.類型:上皮細胞(epithelial)
培養條件:
1.基質:MEM/DMEM培養基
2.血清:10%FBS
3.環境:37℃, 5% CO2
4.消化:0.25%
5.傳代:1:6~1:10傳代, 每周一次
6.換液:2~3天
7.凍存:*培養基+ 5% (v/v) DMSO
特別說明:細胞置室溫一段時間后會漂浮起來,要保證貼壁請盡可以讓細胞處于37℃環境。
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