MEF細胞

MEF細胞供應MEF細胞【高活性】現貨供應
細胞相關知識
哺乳細胞的大規模培養方式有三種：貼壁培養、微載體培養、無血清懸浮培養。這三種方式均可用于細胞的大規模培養。細胞在無Ca2+或 含Ca2+培養基中可同樣生長，也可生長在血清濃度降低的培養基中,單層培養細胞在5-10％FBS-DMEM中能生長很好。一般來講，1:10傳代后 ，一周可以長滿。嚴禁過度生長，這點很重要。因為會導致細胞密度加大和堆積，影響病毒斑的形成和轉染，傳代時也不易打散。懸浮的 細胞很容易大規模培養，但不容易保持穩定。細胞在傳代120次以后，其表型可能改變，生長狀況不再*是單層的了，偶爾會形成局 部的細胞成團聚集，應立即拋棄，重新引入新傳代的細胞。


1、用大瓶培養較小瓶要好，可能是更有利于293均勻的分布，利于營養的攝取
2、培養液要新鮮，每次只配1000ml，分為2-4瓶，不用的培養液，凍存在-20度
3、要及時傳代，是細胞基本鋪滿培養瓶底部，但是細胞之間還沒有*貼緊，總是多少有空隙的時候。
4、如果細胞貼壁不好，可能是消化過久，或是培養瓶不夠干凈，當然要除外細胞污染。
5、如果使用用玻璃培養瓶或皿，可以采用高壓滅菌的0.2%明膠溶液預處理培養/培養皿，方法是將明膠加入培養皿，使之浸泡到底面的各 個部分，然后吸出，置超凈臺內晾干即可使用。這樣處理后細胞貼壁效果好且鏡下細胞立體感強。如果是新的塑料培養瓶就不用處理。

物種來源：
1.種屬：人（Human）
2.器官：胚腎（embryonic kidney）
3.類型：上皮細胞（epithelial）
培養條件：
1.基質：MEM/DMEM培養基
2.血清：10%FBS
3.環境：37℃, 5% CO2
4.消化：0.25%
5.傳代：1：6~1：10傳代, 每周一次
6.換液：2~3天
7.凍存：*培養基+ 5% （v/v） DMSO
特別說明：細胞置室溫一段時間后會漂浮起來，要保證貼壁請盡可以讓細胞處于37℃環境。

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