FITC-Dextran標記葡聚糖是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物,經(jīng)熒光素標記所得的合成探針。
FITC-Dextran 40 (FD40) FITC標記葡聚糖(40 kDa)
產(chǎn)品標簽
FITC-Dextran FITC標記葡聚糖;FD40; FD70;TRITC-dextran 羅丹明標記葡聚糖;TD40;TD70;microcirculation 微循環(huán)研究;Cell permeability 細胞滲透性研究;Microfluorimetry 顯微熒光測定法;
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
FITC-Dextran 40 (FD40) FITC標記葡聚糖(40 kDa) | MS0904-0050MG | 50mg | 838 |
FITC-Dextran 40 (FD40) FITC標記葡聚糖(40 kDa) | MS0904-0250MG | 250mg | 2548 |
FITC-Dextran 40 (FD40) FITC標記葡聚糖(40 kDa) | MS0904-1000MG | 1g | 6948 |
產(chǎn)品描述
FITC標記葡聚糖(FITC-Dextran)是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物,經(jīng)熒光素標記所得的合成探針。熒光素基團通過一個穩(wěn)定的硫代氨甲酰鍵連接到葡聚糖上(見附錄圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征),此標記步驟不會引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran內(nèi)每個葡萄糖單位含0.002~0.008 mol FITC,這一低水平的替換確保葡聚糖小的結構變化,這一特性對滲透性研究來說是基本需求。
FITC標記葡聚糖(FITC-Dextran)廣泛用于微循環(huán)和細胞通透性研究,通過熒光顯微測定法來檢測。還可用于植物細胞壁多孔性和毛細血管通透性研究。血漿蛋白不會結合FITC-Dextran。
FITC標記葡聚糖(FITC-Dextran)用于心血管、微循環(huán)、灌注、細胞單層和細胞膜滲透性研究,作為一種熒光流動示蹤化合物,來支持對血流、膜損傷、血管引流和腎清除等過程的測定。小分子量的FITC-Dextran也能用來測定比如內(nèi)吞。FITC-Dextran 40(FD40)可能用于研究細胞內(nèi)吞行為。也可能用于研究內(nèi)皮單細胞層孔隙度和細胞層內(nèi)頂端到基底膜的運動。
本品是對平均分子量約40kDa葡聚糖進行標記的熒光素衍生物,即異硫氰酸熒光素葡聚糖40(fluorescein isothiocyanate dextran 40, FITC-dextran, FD40),以凍干粉形式提供,易溶于水,大激發(fā)和發(fā)射波長分別為493和517nm。
產(chǎn)品特性
1) CAS NO:60842-46-8
2) 化學名:Dextran(3′,6′dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate
, average Mw of approximately 40,000
3) 同義名:Fluorescein isothiocyanate-dextran 40; Fluoresceinyl thiocarbamoyl-dextran 40;
4) 分子量:average Mw 35,000-45,000
5) 置換率:0.002~0.008 mol FITC/glucose unit
6) 外觀:黃色至深橘色粉末
7) 溶解性:易溶于水或鹽溶液,也溶于DMSO,甲酰胺和某些其他極性有機溶劑,不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯防和二甲基甲酰胺(DMF)
8) 光譜特性:Ex/Em=493/517nm【由于熒光素基團的電荷狀態(tài)依賴于緩沖液的pH和離子強度,因此熒光強度也會因這些參數(shù)的變化而變化。pH>8觀察到大熒光強度。生理緩沖液能顯著影響熒光強度,或得到增加或受到抑制。見附錄圖2. pH 4-9范圍內(nèi)FITC-Dextran 70的熒光變化(Em=520nm)】
保存與運輸方法
保存:室溫避光短期保存,2-8℃避光長期保存,保持密封干燥,至少3年穩(wěn)定。
運輸:室溫運輸。
產(chǎn)品穩(wěn)定性
綜合各種溶液體系和溫度下FITC-Dextrans的穩(wěn)定性測定,總的來說,體內(nèi)外FITC-Dextrans的穩(wěn)定性非常優(yōu)秀。僅當pH>9和上升溫度內(nèi)熒光素可能存在水解的風險。兔血漿、肌肉勻漿液、肝臟勻漿液和尿液內(nèi)的FITC-Dextrans在37℃,至少3天內(nèi)保持穩(wěn)定,分子量不會發(fā)生變化,且未發(fā)現(xiàn)熒光素基團的釋放。6%三lu乙酸內(nèi)FITC-Dextrans室溫穩(wěn)定保存3天?!疚墨I來源:P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】
硫代氨甲酰鍵的水解產(chǎn)生4-或5-氨基熒光素,能立即被HPLC定量檢測到。未發(fā)表的研究數(shù)據(jù)顯示,將高壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長達5個月,發(fā)現(xiàn)僅在50℃情況下可能觀察到微量(1%)的自由氨基熒光素含量增加。單獨進行高壓處理會引起2.7%的自由氨基熒光素產(chǎn)生。
其他的未發(fā)表研究顯示,F(xiàn)ITC-Dextran在pH4溶液35℃內(nèi)能穩(wěn)定保存高達1年。而在pH4,80℃內(nèi)硫代氨甲酰鍵穩(wěn)定30min,可能觀察到葡聚糖的降解。pH9,35℃內(nèi)存放一個月以上會發(fā)生一定量(24%)的熒光衰減。
一些研究證明,F(xiàn)ITC-Dextrans在持續(xù)性實驗(1-6天)的體內(nèi)穩(wěn)定性。【文獻來源:N. Thorball, FITC-dextran tracers in microcirculatory and permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.】
注意事項
1) FITC-Dextrans易溶于水或鹽溶液,可根據(jù)實際使用濃度配制適當濃度的母液。
2) FITC-Dextrans溶液高壓滅菌可能導致少量氨基熒光素的釋放,若需要無菌,建議用過濾的方法來除菌。
3) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附錄
圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征
圖2. pH 4-9范圍內(nèi)FITC-Dextran 70的熒光變化(Em=520nm)
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
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FITC-Dextran標記葡聚糖
FITC-Dextran標記葡聚糖