細(xì)胞:MDA-MB-436細(xì)胞
中文名稱:人乳腺腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)基:L15+10%FBS+0.01mg/ml胰島素(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
MDA-MB-436細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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研究人員利用RNA干擾方法確定出真渦蟲中再生和干細(xì)胞功能所需的特定基因。RNAi通過(guò)干預(yù)基因中所含的蛋白制造指令傳遞到細(xì)胞中的蛋白制造位點(diǎn)來(lái)干擾蛋白質(zhì)合成過(guò)程。
ECC-1細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
研究人員評(píng)估了用RNAi干擾完整動(dòng)物特定基因后產(chǎn)生的生理缺陷以及切斷的動(dòng)物中副胚層擴(kuò)增的情況。研究確定出了對(duì)正常生理過(guò)程至關(guān)重要的基因以及干細(xì)胞候選調(diào)節(jié)因子和再生順序指導(dǎo)因子。
Eca-109細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% RPMI-1640、10% FBS
這項(xiàng)研究表明RNAi在研究有機(jī)體系統(tǒng)的基因功能中具有重要意義,并且確定真渦蟲成為一種干細(xì)胞分子遺傳、再生和組織動(dòng)態(tài)平衡研究的強(qiáng)大模型。這些基因和表現(xiàn)型的進(jìn)一步分析將有助于深入了解顯性功能中的個(gè)體基因如何調(diào)節(jié)再生;
EMT6細(xì)胞:貼壁細(xì)胞 通派細(xì)胞庫(kù)培養(yǎng)條件:90% DMEM高糖、10% FBS