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上海博湖生物科技有限公司
主營產品： 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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公司信息
- 聯系人：
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- 郵編：
- 200000
- 個性化：
- www.shbhbio-e.com
| 參考價 | ￥234000 |
-
型號
-
品牌
其他品牌 -
廠商性質
經銷商 -
所在地
上海市
| 100萬U | 234000元 | 15 盒 可售 |
更新時間：2023-11-10 07:09:13瀏覽次數：689
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公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
商品屬性
貨號 | 產品名稱 | 規格 |
P-PR1244 | HotStart Bst4.2 大規格(125ml包裝酶) | 100萬U |
Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 經酶電子重構架和進化篩選（in silico Design & invitro Evolution），其為Bst4.0 的升級品，通用于 DNA 或 RNA 的 LAMP 或RT-LAMP 擴增。
性能提升包括 ：
（1 ）Bst 4.2 全系包含 熱啟動Aptamer，該配體確保酶在<30℃時，酶活封閉效率>95%,在>60℃時 1min 內釋放酶活。該特性利于室溫建立反應體系，并大幅降低了低溫條件下的非特異擴增；
（2）反應溫度提升到 70℃，大幅降低引物 Dimer 的形成，提高擴增特異性，并使得粗樣品核酸釋放更加充分；
（3）全系包含 Helicaser，因此，允許在不使用 F3/B3 引物的情況下進行 LAMP 擴增（easy LAMP），并允許 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。這將進一步降低非特異擴增，并使得擴增均一性大幅提升。
注意： HotStart Bst 4.2 DNA/RNA Polymerase（8U/μl）不含有甘油，可用于凍干體系的建立。
儲存：長期保存請置于-20℃以下（12 個月有效）；制品反復凍融 10 次不影響性能，但應避免反復凍融；制品由于含有高濃度的糖組分，-20℃保存的酶制品，在融化時可能會有結晶物，此時在 30℃的溫度下融化，過高的溫度可能會導致熱啟動性能下降。一經融化推薦置于 2-8℃保存，在此條件下制品穩定儲存 6 個月。
特殊說明：
（1） Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 擴增時的推薦反應溫度為 65-70℃，反應溫度為 70℃。因此其可替代 的 Bst4.0 系列，用于標準 LAMP的擴增。
（2） 由于 Helicaser 的反應溫度為 70℃，因此在進行eLAMP 擴增時，反應溫度為 70℃。
1. 標準 LAMP 擴增
1.1 10xLAMP Primer Mix：FIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4
μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 配制 LAMP 反應體系
10xBst4.2 Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100mM Mg2+
1.5 μl
dNTP Mixture（10 mM each） 3 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
HotStart Bst 4.2（8U/μl） 1 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
1.3 反應體系配好后，置于 65-70°C 反應 20~30min。
2. eLAMP 擴增
2.1 10xeLAMP Primer Mix ： FIP/BIP=8 μM each;
LF/LB=4 μM each。
注意：eLAMP（easy LAMP）為去除 F3/B3 引物的方法，為 Bst4.2 系列專用的使用策略，對于大多數引物組，在Helicaser 的加持下，擴增速度幾乎不受影響。如引物擴增效率低，可提高 FIP/BIP 濃度到 12~16uM。
2.2 配制 eLAMP 反應體系
10xBst4.2 Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100mM Mg2+
1.5 μl
dNTP Mixture（10 mM each） 3 μl
10xeLAMP Primer Mix 2.5 μl
HotStart Bst 4.2（8U/μl） 1 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
2.3 eLAMP 的擴增溫度為 70°C，反應 20~30min。
其它注意事項
(1) 制品中包含高濃度的鹽組分，使用時做好個人防護，防止制品與皮膚、眼、鼻、呼吸道等接觸和吸入，一旦接觸或吸入，請用大量的清水沖洗。
(2) 防止氣溶膠污染，盡可能進行分區操作。
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