產品介紹:
Oroboros O2k是目前國際認可度很高的一款細胞能量代謝測量/分析產品。
O2k系統通過高分辨率的極譜氧電極和全功能的熒光技術實現對樣本的線粒體呼吸功能以及生物體的能量代謝進行精準定量及分析。
O2k其應用范圍幾乎涉及所有與細胞或線粒體能量代謝相關的領域。
多功能參數檢測:可同時檢測耗氧率、呼吸速率、呼吸控制比率、PH值、膜電位、離子濃度、自由基、ROS、ATP、Ca2+、NO。
多種樣品適用:可用于直接測量線粒體、細胞、組織器官,或者細菌、植物細胞等。
Oroboros O2K技術優勢
高精度電極檢測方法
實驗使用試劑開放,無實驗耗材消耗
封閉性檢測環境,可進行低氧/常氧/高氧實驗
擁有加熱/制冷模塊,可實現電子控溫,溫度精度高
精準定量檢測方式,直接檢測樣本消耗O2的含量
具有攪拌系統的檢測腔,確保腔室內樣本溶液均勻,可提高檢測樣本的準確性和實驗重復性
性能特點:
雙通道系統
測量樣本容量1.5ml-3.5ml
溫度范圍:4-47℃,可進行低溫試驗
具有可變速的磁力攪拌功能
極譜氧電極傳感器,檢測氧流量分辨率為1 pmol O2?s-1?ml-1
熒光檢測單元:雙通道/四通道。
熒光檢測參數包括:線粒體膜電位、H2O2、ATP、Ca2+、ROS、自由基。
樣品腔為杜蘭玻璃、鈦金屬等極低活性的材質,降低背景氧干擾。
同步顯示流動氧的濃度;自動進行氧信號的校正。
雙通道,具有注射和回抽的功能,自動化控制,可在軟件的編程下進行定時、定量的精準加樣,不限制加樣次數。
專用組織勻漿工具,采用勻漿管技術對樣本進行研磨,樣本需求量少至幾毫克。
可自由設計實驗,根據實驗設計實時的加入不同的底物、抑制劑等化合物去改變線粒體的呼吸,最多可以加入20多種。
強大的DatLab軟件功能:可實時顯示并記錄所有測量參數;可在實驗過程中隨時更改實驗設計;可自動進行氧氣等參數的校準;具有Protocol編程功能,支持客戶自定義編程以便重復實驗,同時廠家提供多種Protocol程序,方便客戶選用。
應用案例1:
實驗目的為探究不同濃度解耦聯劑FCCP對細胞氧耗率OCR的影響。
細胞經氧化磷酸化抑制劑寡酶素處理后,細胞的耗氧率顯著降低,使細胞呼吸達到Leak水平。
實驗第30分鐘開始加入0.5uM FCCP,并每間隔120秒逐量增加0.5uM.
實驗數據結果顯示,隨著FCCP濃度的不斷增加,細胞耗氧量呈現顯著增加,并且在FCCP濃度加入劑量為5.5uM時達到值,
而再增加濃度并不會使細胞耗氧率出現顯著增加,這表明FCCP的濃度為5.5uM。
應用案例2:
實驗目的為了解細胞的能量代謝機制。
實驗樣本為不同量的人類股外側肌組織,將樣本A 3.4mgWw組織與樣本B 2.8mgWw 組織分別置于雙通道的細胞代謝測量分析系統中,并分別加入蘋果酸、辛酰肉堿、ADP、、琥珀酸、魚藤酮、丙二酸、粘噻唑、以及抗霉素等,觀察細胞的耗氧情況。紅色曲線為樣本A,綠色曲線為樣本B,實驗數據顯示不同量樣本加入相同劑量的藥物后耗氧率基本相同。
應用案例3:
測量細胞為小鼠骨髓癌細胞。
實驗中使用TIP 2k微型滴定泵加入解耦聯劑FCCP,實驗設定滴定間隔120秒,循環滴定15次,每次逐量增加0.5uM,加藥濃度從0.5uM-7.5uM。耗氧率隨解耦聯劑FCCP的不同濃度的變化而不同;O2含量逐步下降。
應用案例4:
實驗為測量小鼠心肌細胞的耗氧率與H2O2之間的相互作用。實驗中分別添加活性氧、琥珀酸鹽、、ADP、寡霉素、FCCP以及細胞色素C,實驗設置為不同實驗樣本中加入藥物的劑量相同,但順序不同,實驗數據顯示不同的藥物添加順序對細胞代謝、氧化磷酸化過程產生了不同的影響。(藍色曲線為氧含量;紅色為耗氧量變化曲線;綠色為H2O2變化曲線。)