上海銳谷生物科技有限公司作者
從不同地區和雞群分離到的NDV對雞的致病性有明顯差異。根據不同毒力毒株感染雞表現的不同,可將NDV分為幾種致病型:
①速發型或強毒型毒株,在各種年齡易感雞引起急性致死性感染;
②中發型或中毒型毒株,僅在易感的幼齡雞造成致死性感染;
③緩發型(即低毒型)或無毒型毒株,表現為輕微的呼吸道感染或無臨診癥狀腸道感染。
NDV的毒力分型必須進行生物學試驗,即依據雞胚平均死亡時間(MBT),1日齡雛雞腦內接種致病指數(1CPl)和6周齡雞靜脈接種致病指數(1VPl)來區別。近年來,研究者在用試管內試驗進行NDV的毒力分型方面做了很大的努力,一種基于反轉錄—聚合酶鏈反應(RTPCR)技術將NDV分為強毒和弱毒的方法已日趨成熟。這方面的進展源于近10多年來對決定NDV毒力的分子基礎有了深入的了解。NDV在復制過程中,功能上重要的F蛋白以其前體FO的形式被合成(只有FO被裂解為n和F2),這樣子代病毒才有傳染性,而這種裂解是由宿主細胞的蛋白酶介導的。NDV強毒在細胞培養上能產生蝕魔,而弱毒不能產生蝕斑,這是由于該宿主細胞缺乏裂解弱毒FO的蛋白酶。如在培養過程中加入*,則弱毒也能復制并產生蝕斑。研究表明,強毒和弱毒的主要差異是在FO的112—117位氨基酸基序即裂解位點上。所有NDVF蛋白的116位(F2蛋白C端)均為*(R)。所有低毒力毒株117位(Fl蛋白的N端)均為*(L),而113位有另一個堿性氨基酸。相反,所有強毒和中毒株117位均為苯*(F),除了113位和116位外還有115位和112位兩個堿性氨基酸。因此決定NDV致病性的機制與流感病毒相似,主要是F蛋白裂解部位的氨基酸基序。強毒含有多個堿性氨基酸殘基,裂解帶這種結構FO的蛋白酶廣泛存在于不同宿主組織和器官的各種類型的細胞中;而弱毒不含有多個堿性氨基酸,裂解帶這種結構的FO需要*樣酶類,它們只存在于呼吸道和消化道上皮細胞等少數類型的細胞中。所以弱毒只引起局部感染,而強毒則會造成致死性全身感染。進一步的研究表明,對雞表現高毒力的毒株,裂解部位基序的zui低要求是—113RXR/KRxFll7。117位的苯*對強毒是必需的,這一點的原因尚未搞清楚。
單克隆抗體(MAb)可以檢查NDV毒株間微小的抗原差異,用一組不同的MAb可以將NDV不同的毒株和分離物劃分為不同的群,處在同一群中的病毒具有相同的生物學和流行病學特點,在流行病學研究中具有重要價值。但是近年來用分子生物學方法確定NDV的基因型和遺傳發生關系,以追蹤感染的來源和傳播范圍比用單抗更能得出肯定的結果。根據NDV毒株F基因的序列、特定的酶切圖譜和F蛋白可變區氨基酸殘基變化,可將它們分為9個基因型,基因I型主要為從水禽或雞分離的無毒株,基因Ⅱ~Ⅳ型為20世紀20年代中期至50年代后期*次大流行期間分離到的毒株,基因V型和Ⅵ型是20世紀60年代和70年代第二次大流行期間出現的毒株.基因Ⅵb亞型是80年代鴿源的第三次大流行中出現的病毒,基因Ⅷ型和Ⅶ型分別在20世紀80年代和90年代出現。其中,基因Ⅳ型是中國*的基因型,這一型包括中國的標準強毒株F48。在時間、地理、抗原或流行病學上相同的毒株往往分在同一個基因型或基因亞型,在遺傳發生樹上形成一個特殊的系或分支,這對估價NDV的流行病學和局部傳播有重要價值。自20世紀90年代中期以來,我國ND流行的大致情況是;在一些地區有基因Ⅷ型和Ⅳ型引起的散發流行,基因Ⅵ型病毒在流行中出現的頻率更高些,引起暴發流行的優勢基因型是Ⅶ型,包括引起大數雞群和鵝群暴發ND的基因Ⅶd亞型。
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