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細胞名稱 大鼠肺成纖維樣細胞;RL1品牌
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一大鼠的肺組織。2007年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%FBS
傳代方法 1:
2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
細胞培養步驟:
一.大鼠肺成纖維樣細胞;RL1品牌培養基及培養凍存條件準備:
1)準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項:
1.收到大鼠肺成纖維樣細胞;RL1品牌后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯絡。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質量規格:含量測定Zileuton-d4齊留通-d4
質量規格:>94%,BRStilbazo芪偶氮
質量規格:含量測定Kirenol奇任醇(標準品)
質量規格:含量測定Cibacronblue3G-A汽巴藍
質量規格:供檢查用OroxylinA千層紙素A(標準品)
質量規格:含量測定Oroxyloside千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷
質量規格:>98%,BRCepharanthine千金藤素
質量規格:含量測定Cepharanthine千金藤素(標準品)
CyclinE2周期素E2抗體規格:0.2mlRabbitAnti-humanIgGF(ab')2/HRP辣根過氧化物酶標記的兔抗人IgGF(ab')2規格:0.1ml
SARSputativeorflabpolyprotein冠狀病毒抗體規格:0.2mlTIP30TIP30蛋白抗體規格:0.2ml
phospho-IKKgamma(Ser85)磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體規格:0.1mlNCKAP1膜相關的蛋白質HEM2抗體規格:0.2ml
BMP5骨形態發生蛋白5抗體規格:0.1mlATHIII抗凝酶3抗體規格:0.2ml
APC5細胞分裂周期蛋白5抗體規格:0.2mlFAM98BFAM98B蛋白抗體規格:0.2ml
Endotheliallipase內皮脂肪酶抗體規格:0.2mlSAMD7SAMD7蛋白抗體規格:0.2ml
SUPT16H/CDC68染色體特異性轉錄延伸因子抗體規格:0.2mlHIF-1Alpha缺氧誘導因子1α抗體HIF-1α規格:0.1ml
SHC3SH2結構域蛋白C3抗體規格:0.2mlADAMTS10整合素樣金屬蛋白酶與凝酶10型抗體規格:0.1ml
CollagenIII抗Ⅲ型膠原抗體規格:0.1mlDonkeyAnti-humanIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標記的驢抗人IgG規格:0.1ml
C20orf19520號染色體開放閱讀框195抗體規格:0.2mlATG16L2自噬體ATG16L2蛋白抗體規格:0.2ml
大鼠肺成纖維樣細胞;RL1品牌ALOX15B/15Lipoxygenase2抗體,兔單抗*
ALOX15B/15Lipoxygenase2抗體,兔多抗*
ALOX15B/15Lipoxygenase2抗體,兔多抗,抗原親和純化*
ALOX5AP/FLAP抗體,兔多抗,抗原親和純化*
Alpha-2-glycoprotein/AZGP1抗體,兔單抗*
Alpha-2-glycoprotein/AZGP1抗體,兔多抗*
alpha-2-macroglobulin/A2M抗體,兔單抗*
大鼠肺成纖維樣細胞;RL1品牌在運輸的過程中,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產品的狀況,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要立即打開培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱過夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如果發現細胞仍不能貼壁,請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理;如若證實細胞無活力,請在收到貨后48小時內將細胞狀態反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
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