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細胞名稱 人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10費用
形態特性 梭形
生長特性 貼壁生長
特征特性 采用脂質體轉染的方法,穩定轉染CHO細胞野生型AβPPTS1 基因,所得細胞表達野生型AβPPTS1蛋白。
培養條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;250ug/ml G418
傳代方法 1:
3傳代;2~3天一次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
細胞培養步驟:
一.人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10費用培養基及培養凍存條件準備:
1)準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
注意事項:
1.收到人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10費用后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯絡。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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質量規格:>98%,BRMadecassicacid羥基積雪草酸
質量規格:含量測定Madecassicacid羥基積雪草酸(標準品)
質量規格:含量測定HydroxyItraconazole羥基基*
質量規格:HPLC≥99%,標準品QuetiapineHydroxyImpurity羥基*雜質
質量規格:鑒別Hydroxytyrosol羥基酪醇;3,4-二羥基苯乙醇(標準品)
質量規格:HPLC≥95%,標準品HydroxyRitonavir羥基*
質量規格:含量測定Hydroxyapatite羥基磷灰石
質量規格:>99%,血小板生成素受體激動劑Hydroxynaphtholblue羥基萘酚藍
Polycystin1多囊蛋白1抗體規格:0.2ml
LASS4壽相關基因lASS4抗體規格:0.2ml
Importin4/RanBP4核蛋白4抗體(Ran結合蛋白4)規格:0.2ml
SSEA3階段特異性胚胎表面抗原-3抗體規格:0.1ml
MMS19DNA修復磺酸敏感性基因19抗體規格:0.2ml
CTH/CSE/Cystathionase胱硫醚γ裂解酶抗體規格:0.2ml
SREBP-2*調節元件結合蛋白2抗體規格:0.1ml
Nebulin伴肌動蛋白抗體規格:0.1ml
CCDC96卷曲螺旋結構域蛋白96抗體規格:0.2ml
Slitrk1神經突出相關蛋白Slitrk1抗體規格:0.2ml
人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10費用AntibioticAgar250g抗生素檢定培養基1號(低PH)
Andrade’sCarbohydrateBroth250gAndrade氏糖類肉湯
Anaerobicgasproductingbag10個/包2.5L厭氧產氣包
AnaerobicBeefLiverBroth250g厭氧肉肝湯培養基
AnaerobicAgar250g厭氧菌瓊脂
AmmoniumDextroseMedium250g葡萄糖銨培養基
AmiesTransportMedium20支/包Amies運送培養基管
人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10費用在運輸的過程中,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產品的狀況,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要立即打開培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱過夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如果發現細胞仍不能貼壁,請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理;如若證實細胞無活力,請在收到貨后48小時內將細胞狀態反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
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