上海博湖生物科技有限公司
主營產品: 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
聯系電話
18117197628
公司信息
- 聯系人:
- 陳經理
- 電話:
- 021-57763112
- 手機:
- 18117197628
- 售后電話:
- 18117197628
- 傳真:
- 86-021-57690166
- 地址:
- 上海閔行區碧泉路36弄銀宵大廈B102
- 郵編:
- 200000
- 個性化:
- www.shbhbio-e.com
參考價 | 面議 |
- 型號
- 品牌
- 廠商性質 經銷商
- 所在地 上海市
更新時間:2023-10-26 20:28:31瀏覽次數:627
聯系我們時請說明是環保在線上看到的信息,謝謝!
ATCC15834 感受態細胞100ul*100以下是的訂購信息儲存條件:-70℃凍存
操作方法:
1. 取-80℃保存的農桿菌感受態于室溫或手心片刻待其部分融化,處于冰水混合狀態時插入冰中。
2.每100 μl感受態加入0.01-1 μg質粒DNA(轉化效率較高,*次使用前做預實驗確定所加質粒的量),用手管底混勻,依次于冰上靜置5分鐘、液氮5分鐘、37℃水浴5分鐘、冰浴5分鐘。
ATCC15834 感受態細胞100ul*1003. 加入700 μl無抗生素的LB或YEB液體培養基,于28℃振蕩培養2~3小時。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應抗生素的LB或YEB平板上,倒置放于28℃培養箱培養2-3天
注意事項
1. 加入質粒時體積不應大于感受態體積的1/10;質粒不純或存在乙醇等有機物污染,轉化效率急劇下降;質粒增大一倍,轉化效率下降一個數量級。
ATCC15834 感受態細胞100ul*1002. 混入質粒時應輕柔操作。轉化高濃度的質粒可相應減少終用于涂板的菌量。
3. 平板上陽性克隆密度過大時,由于營養不足,陽性克隆生長變慢,菌落變小,為了獲得大的菌落,應減少質粒用量。
4. *濃度不應高于25 μg/ml,過高的*濃度不利于農桿菌生長,會降低其生長速度和轉化效率。本公司感受態計算轉化效率時所用平板只含有50 μg/ml kan,若所用平板含有20 μg/ml rif則轉化效率降低到1/2。
5. 培養基中加入*的目的是防止雜菌生長、篩選農桿菌;根據所用菌株抗性加入Ti質粒篩選抗生素可防止Ti質粒丟失,但Ti質粒篩選抗生素不利于農桿菌的轉基因操作,所以一般培養農桿菌時不考慮這些抗生素,Ti質粒丟失的概率極低(可以忽略)。
1
MCP-4/CCL13 人單核細胞趨化蛋白4 規格: 48T/96T
MCP-3/CCL7 人單核細胞趨化蛋白3 規格: 48T/96T
MCP-2/CCL8 人單核細胞趨化蛋白2 規格: 48T/96T
HSV-Ag2 人單純皰疹病毒抗原2 規格: 48T/96T
HSV-Ag1 人單純皰疹病毒抗原-1 規格: 48T/96T
HSV-Ag1 人單純皰疹病毒抗原-1 規格: 48T/96T
HSVⅡ-Ab 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體 規格: 48T/96T
MAO 人單胺氧化酶 規格: 48T/96T
Big ET 人大內皮素 規格: 48T/96T
Big ET 人大內皮素 規格: 48T/96T
colicin 人大腸菌素 規格: 48T/96T
CCSA-4 人大腸癌專一抗原4 規格: 48T/96T
CCSA-3 人大腸癌專一抗原3 規格: 48T/96T
CCSA-2 人大腸癌專一抗原2 規格: 48T/96T
PRL 人催乳素 規格: 48T/96T
MF/MPF 人促有絲分裂因子 規格: 48T/96T
GnRH 人*釋放激素 規格: 48T/96T
DSIP 人促睡眠肽 規格: 48T/96T
GHRH 人促生長激素釋放激素 規格: 48T/96T
ACTH 人促腎上腺皮質激素 規格: 48T/96T
CRH 人促腎上皮質激素釋放激素 規格: 48T/96T
FSH 人促卵泡素 規格: 48T/96T
TRH 人促甲狀腺素釋放激素 規格: 48T/96T
TSH 人促甲狀腺素 規格: 48T/96T
TSHR 人促甲狀腺激素受體抗體 規格: 48T/96T
LH * 規格: 48T/96T
人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3 規格: 48T/96T
E3 人雌三醇 規格: 48T/96T
E 人雌激素 規格: 48T/96T
ER 人雌二醇受體 規格: 48T/96T
E2 人雌二醇 規格: 48T/96T
PACAP 人垂體腺苷酸環化酶激活肽 規格: 48T/96T
VMA 人垂草扁桃酸 規格: 48T/96T
PF/PFP 人穿孔素/成孔蛋白 規格: 48T/96T
PF/PFP 人穿孔素/成孔蛋白 規格: 48T/96T
VLA 人遲現抗原 規格: 48T/96T
ATCC15834 感受態細胞100ul*100 VLA 人遲現抗原 規格: 48T/96T
MPF 人成熟促進因子 規格: 48T/96T
OGP 人成骨生長肽 規格: 48T/96T
SOD 人超氧化物歧化酶 規格: 48T/96T
hs-CRP 人超敏C反應蛋白 規格: 48T/96T
4 向每個離心管中加入900 μl 無菌的SOC 或LB 培養基(不含抗生素), 混勻后置于37℃搖床振蕩培養1 小時(160-220 轉/分鐘),目的是使質粒上相關的抗性標記基因表達,使菌體復蘇。
C58C1 電感受態細胞50ul*105 將離心管內容物混勻,吸取100 μl 已轉化的感受態細胞加到含相應抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養基上,用無菌的彎頭玻棒輕輕的將細胞均勻涂開。將平板置于室溫直至液體被吸收,倒置平板,37℃培養12-16 小時。
● 涂布用量可根據具體實驗來調整。如轉化的DNA 總量較多,可取更少量轉化產物涂布平板;反之,如轉化的DNA 總量較少,可取200-300 μl 轉化產物涂布平板。如果預計的克隆較少,可通過離心(4,000 rpm, 2分鐘)后吸除部分培養液,懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉化菌落數過少可以將剩下的菌液再涂布新的培養板)
注意事項
1. 感受態細胞應保存在 -70℃,不可多次凍融和放置時間過長,以避免降低感受態細胞的轉化效率。
2. 進行轉化操作時,應根據相應溫度及無菌條件的要求進行。
3 為防止轉化實驗不成功,可以保留部分連接反應液,以重新轉化,將損失降到低。
以下是的相關產品:
ELISA Kit,48T/96T 規格: 48T/96T
β-Lg 人β乳球蛋白 規格: 48T/96T
β-OHB 人β羥丁酸 規格: 48T/96T
βGD 人β葡萄糖醛酸苷酶 規格: 48T/96T
β-glucosidase 人β葡糖苷酶 規格: 48T/96T
β-naphthol 人β萘酚 規格: 48T/96T
BLI 人β內酰胺酶抑制劑 規格: 48T/96T
β-lactamase 人β內酰胺酶 規格: 48T/96T
β-EPR 人β內啡肽受體 規格: 48T/96T
β-EP 人β內啡肽 規格: 48T/96T
β-Cat 人β連環蛋白/聯蛋白 規格: 48T/96T
β Manase 人β甘露糖苷酶 規格: 48T/96T
IFN-β/IFNB 人β干擾素 規格: 48T/96T
Aβ1-42 人β淀粉樣蛋白1-42 規格: 48T/96T
Aβ1-40 人β淀粉樣蛋白1-40 規格: 48T/96T
β-LPH 人β-促脂素 規格: 48T/96T
βGAL 人β半乳糖苷酶 規格: 48T/96T
β-hexosaminidase A 人β氨基己糖苷酶A 規格: 48T/96T
integrin β2/CD11+CD18 人β2整合素 規格: 48T/96T
BMG/β2-MG 人β2微球蛋白 規格: 48T/96T
β2-GP1 Ab IgM 人β2糖蛋白1抗體IgM 規格: 48T/96T
β2-GP1 Ab IgG 人β2糖蛋白1抗體IgG 規格: 48T/96T
β2-GP1 IgA/G/M 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 規格: 48T/96T
β2-GP1 Ab IgA 人β2糖蛋白1抗體IgA 規格: 48T/96T
β2-GP 人β2糖蛋白 規格: 48T/96T
α-enolase 人α烯醇化酶 規格: 48T/96T
α-SYN 人α突觸核蛋白 規格: 48T/96T
α-La 人α乳清蛋白 規格: 48T/96T
αHBDH 人α羥基丁酸脫氫酶 規格: 48T/96T
α-glucosidase 人α葡萄糖苷酶 規格: 48T/96T
α-SMA 人α平滑肌肌動蛋白 規格: 48T/96T
α-EP 人α-內*肽 規格: 48T/96T
α Actin 人α肌動蛋白 規格: 48T/96T
α-SCA 人α橫紋肌肌動蛋白 規格: 48T/96T
α-GST 人α*S轉移酶 規格: 48T/96T
α Manase 人α甘露糖苷酶 規格: 48T/96T
C58C1 電感受態細胞50ul*10
ACTN-3 人α-輔肌動蛋白3 規格: 48T/96T
Gal 人α半乳糖基抗體 規格: 48T/96T