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上海博湖生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： 高密度脂蛋白ELISA檢測試劑盒,同型半胱氨酸ELISA檢測試劑盒,游離脂肪酸ELISA檢測試劑盒 |
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更新時間：2023-10-26 20:30:33瀏覽次數(shù)：632
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Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 操作方法（以下操作均按無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行）
1 取感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中，如需分裝可將剛?cè)诨?xì)胞懸液分裝到無菌預(yù)冷的離心管中，置于冰浴中。
● 一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞的建議用量為50-100 μl，可以根據(jù)實際情況分裝使用。應(yīng)注意所用DNA 體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞懸液體積的十分之一。
以下實驗以100 μl感受態(tài)細(xì)胞為例。
Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞100ul*102 向感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入目的DNA（100 μl 的感受態(tài)細(xì)胞能夠被1 ng 超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和），輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，使細(xì)胞冷卻2-3 分鐘，該過程不要搖動離心管。
4 向每個離心管中加入900 μl 無菌的SOC 或LB 培養(yǎng)基（不含抗生素）， 混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1 小時（160-220 轉(zhuǎn)/分鐘），目的是使質(zhì)粒上相關(guān)的抗性標(biāo)記基因表達(dá)，使菌體復(fù)蘇。
5 將離心管內(nèi)容物混勻，吸取100 μl 已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞加到含相應(yīng)抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的彎頭玻棒輕輕的將細(xì)胞均勻涂開。將平板置于室溫直至液體被吸收，倒置平板，37℃培養(yǎng)12-16 小時。
Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10● 涂布用量可根據(jù)具體實驗來調(diào)整。如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取更少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；反之，如轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。如果預(yù)計的克隆較少，可通過離心（4,000 rpm, 2分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。（涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少可以將剩下的菌液再涂布新的培養(yǎng)板）
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在 -70℃，不可多次凍融和放置時間過長，以避免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 進(jìn)行轉(zhuǎn)化操作時，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件的要求進(jìn)行。
3 為防止轉(zhuǎn)化實驗不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，將損失降到低。
以下是的相關(guān)產(chǎn)品：
HDV IgG 人丁型肝炎IgG 規(guī)格： 48T/96T
AZT 人 規(guī)格： 48T/96T
ASK-1 人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I 規(guī)格： 48T/96T
FASL 人凋亡相關(guān)因子配體 規(guī)格： 48T/96T
FAS/CD95 人凋亡相關(guān)因子 規(guī)格： 48T/96T
βAPP 人淀粉樣前體蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Amylase 人 規(guī)格： 48T/96T
ETFB 人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽 規(guī)格： 48T/96T
FⅧAg 人第八因子相關(guān)抗原 規(guī)格： 48T/96T
Resistin 人抵抗素 規(guī)格： 48T/96T
HIF-1α 人低氧誘導(dǎo)因子1α 規(guī)格： 48T/96T
LRP-6 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6 規(guī)格： 48T/96T
LDLR 人低密度脂蛋白受體 規(guī)格： 48T/96T
LDL-IC 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物 規(guī)格： 48T/96T
LDL 人低密度脂蛋白 規(guī)格： 48T/96T
LMP7/PSMB9 人低分子質(zhì)量蛋白7 規(guī)格： 48T/96T
LMWH 人低分子肝素 規(guī)格： 48T/96T
NGF 人的神經(jīng)生長因子 規(guī)格： 48T/96T
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit，48T/96T 人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T
ConA 人刀豆素A 規(guī)格： 48T/96T
PLP 人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T
PR3-ANCA 人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體 規(guī)格： 48T/96T
PPP1R1A 人蛋白磷酸酶1調(diào)控/抑制因子亞基1A 規(guī)格： 48T/96T
PP 人蛋白磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T
PTP/PTPase/CD148 人蛋白磷酸酶 規(guī)格： 48T/96T
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PTK/CD115 人蛋白激酶 規(guī)格： 48T/96T
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PKC 人蛋白激酶C 規(guī)格： 48T/96T
PKB 人蛋白激酶B 規(guī)格： 48T/96T
PKA 人蛋白激酶A 規(guī)格： 48T/96T
PDI 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體 規(guī)格： 48T/96T
PDIA3 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3 規(guī)格： 48T/96T
Protein Z 人蛋白Z 規(guī)格： 48T/96T
Protein S 人蛋白S 規(guī)格： 48T/96T
Y1HGold 感受態(tài)細(xì)胞100ul*10 Protein C 人蛋白C 規(guī)格： 48T/96T
肽酰脯氨酰順/反異構(gòu)酶 人蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Elastase 人彈性蛋白酶 規(guī)格： 48T/96T
Elastin 人彈性蛋白 規(guī)格： 48T/96T
Cholic acid 人膽酸 規(guī)格： 48T/96T
CCK-8 人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽 規(guī)格： 48T/96T
CCK 人膽囊收縮素/腸促肽 規(guī)格： 48T/96T
CHAc 人乙酰化酶 規(guī)格： 48T/96T
CETP 人酯轉(zhuǎn)移蛋白 規(guī)格： 48T/96T
listeriolysin 人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素 規(guī)格： 48T/96T
