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| 貨號 | BK-01S6602 |
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特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱：己糖激酶（HK）測試盒紫外分光光度法
產品規格：50管/48樣
檢測方法：紫外分光光度法
產品貨號：BK-01S6602
產品分類：糖酵解系列
商品介紹：
測定意義: HK（EC 2.7.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，是葡萄糖分解過程中的個關鍵酶，催化葡萄糖轉化為6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途徑的交叉點。 測定原理 HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH，NADPH在340nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 紫外分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗
樣本和試劑浪費！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本： 先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。 【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。 |
實驗方法學：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些?？梢匀?.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
2 ug pSG5 pSG5 低溫運輸，-20℃保存
50次 柱式葡萄球菌RNAout
250mL MOPS Buffer,1.0M,pH6.5 MOPS Buffer,1.0M,pH6.5 常溫保存
波爾頓選擇性增菌肉湯添加劑 Bolton Selective Enrichment broth additive 2ml*5
100mg 果膠 Pectinase（ Aspergillus Niger） 4℃保存
50T 人Her2/neu基因PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
40 μl Tubulin-Tracker Red（微管紅色熒光探針） Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
250mL Casein Blocking Buffer in PBS（酪蛋白封堵劑） Casein Blocking Buffer in PBS 常溫保存
1盒 PAGE膠長加樣槍頭 PAGE Loading Tips 常溫
2 ug pHCMC04 pHCMC04 低溫運輸，-20℃保存
臨床檢驗培養基
己糖激酶（HK）測試盒紫外分光光度法PANK4 泛酸激4抗體 規格: 0.2ml
CACNB1 鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 規格: 0.2ml
GAPDH 3-磷酸甘油醛脫（兔來源免疫組化用抗體） 規格: 0.1ml
CDK9/Cyclin T1 周期素依賴性激9抗體 規格: 0.1ml
Rabbit anti-MG IgG/FITC FITC標記的兔抗爪沙鼠IgG 規格: 0.3ml
phospho-NFKBIE (Ser157) 磷酸化KB抑制蛋白激ε 規格: 0.1ml
ENTPD5/CD39L4 原基因CD39樣蛋白4抗體 規格: 0.2ml
BMP11 骨形態發生蛋白11抗體 規格: 0.2ml
Phospho-NFKBIA (Tyr42) 磷酸化IKB α抗體 規格: 0.1ml
DP-I 橋粒斑蛋白1抗體 規格: 0.2ml
ADM R 上髓質素受體抗體 規格: 0.1ml
Zyxin/ESP 2 斑聯蛋白抗體 規格: 0.2ml
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
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